Anticorps polyclonal de lapin anti-APOB pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P04114

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ApoB

• L'apolipoprotéine B (ApoB) existe sous deux isoformes principales : l'ApoB-48, synthétisée dans l'intestin et incorporée dans les chylomicrons, et l'ApoB-100, produite dans le foie et présente dans les particules VLDL et LDL.
• L'ARNm de l'ApoB subit une édition ARNm spécifique aux tissus, qui introduit un codon stop prématuré pour générer l'isoforme tronquée ApoB-48 dans l'intestin.
• L'ApoB-100 agit comme ligand pour le récepteur LDL (récepteur apoB/E), médiant la liaison cellulaire et l'internalisation des particules LDL.
• L'ApoB joue un rôle central dans le métabolisme et le transport des lipides, intervenant dans l'homéostasie du cholestérol et l'assemblage des lipoprotéines.
• Au niveau sous-cellulaire, l'ApoB est localisée dans le cytoplasme, sécrétée dans le plasma et associée aux gouttelettes lipidiques.
• La protéine subit de multiples modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l'acétylation, la glycosylation, la formation de ponts disulfures et la palmitoylation.
• Les mutations du gène APOB sont associées à l'hypercholestérolémie familiale, l'athérosclérose et d'autres troubles lipidiques.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 1890 à 2190 de l'ApoB-100 humain (NP_000375.3) ; cette région est absente de l'isoforme plus courte ApoB-48, ce qui rend l'anticorps spécifique de l'ApoB-100, sauf indication contraire.
• En raison de son poids moléculaire élevé (~516 kDa), utilisez des gels SDS-PAGE à faible pourcentage (par exemple 6 à 8 %), des temps de transfert prolongés et un marqueur de haut poids moléculaire pour le Western blot.
• Pensez à valider l'anticorps dans le système d'échantillon concerné (par exemple, lysats hépatiques pour l'ApoB-100, lysats intestinaux pour l'ApoB-48) pour confirmer la détection de l'isoforme.
• Pour IHC-P et IF/ICC, optimisez les protocoles de récupération d'antigène (par exemple, récupération d'épitope induite par la chaleur) et les conditions de fixation pour vos types de tissus spécifiques.
• En application ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; une optimisation empirique du tampon de revêtement, du blocage et des conditions de détection est recommandée.

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