Anticorps polyclonal de lapin anti-APOA1 pour WB, IHC-P, ELISA - P02647

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'apolipoprotéine A-I

• L'apolipoprotéine A-I (ApoA-I) est la principale protéine composante des lipoprotéines plasmatiques de haute densité (HDL) et se trouve également dans les chylomicrons, jouant un rôle central dans l'homéostasie du cholestérol.
• Elle médie le transport inverse du cholestérol en favorisant l'efflux du cholestérol hors des tissus périphériques et en agissant comme cofacteur essentiel de la lécithine-cholestérol acyltransférase (LCAT), qui estérifie le cholestérol pour son conditionnement dans les particules HDL.
• L'ApoA-I est une protéine sécrétée synthétisée principalement dans le foie et l'intestin grêle, puis libérée dans la circulation où elle s'associe aux particules lipidiques.
• Le gène APOA1 appartient au cluster de gènes apolipoprotéine A1/C3/A4/A5 sur le chromosome 11 et code une préproprotéine qui subit un traitement protéolytique pour donner la protéine mature de 243 acides aminés.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'oxydation au niveau des Met-110 et Met-136, qui sont augmentées chez les individus présentant des facteurs de risque de maladie coronarienne comme le tabagisme et les variants du gène eNOS ; la protéine peut également être glyquée, nitrée et palmitoylée.
• L'ApoA-I est impliquée dans l'amylose, où certaines variants forment des fibrilles amyloïdes, et dans l'athérosclérose, où les formes oxydées sont enrichies dans les lésions aortiques et corrèlent avec la sévérité de la maladie.
• En tant que composant du complexe SPAP, l'ApoA-I active la motilité des spermatozoïdes, indiquant une fonction extrahépatique au-delà du transport lipidique.
• L'importance de cette protéine dans le métabolisme lipidique est soulignée par son association avec les niveaux de HDL et les maladies cardiovasculaires, ce qui en fait un biomarqueur clé et une cible thérapeutique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 25–267, ce qui correspond à la forme sécrétée mature de l'ApoA-I humain ; pensez à vérifier la réactivité contre la protéine endogène dans des échantillons biologiques pertinents (par exemple, sérum, plasma ou lysats hépatiques).
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 28 kDa ; une bande proche de cette taille dans des échantillons humains, de souris et de rat confirme la réactivité croisée. Optimisez la préparation de l'échantillon pour réduire l'interférence lipidique si vous utilisez du plasma ou du sérum.
• En immunohistochimie (IHC-P), testez l'anticorps sur des coupes de tissus hépatiques ou artériels athéroscléreux inclus dans la paraffine, en utilisant une récupération d'antigène appropriée, car l'ApoA-I est extracellulaire et peut nécessiter des conditions de récupération douces.
• Pour l'ELISA, validez la paire d'anticorps en format sandwich si vous l'utilisez comme réactif de capture ou de détection ; la nature polyclonale peut permettre une amplification du signal mais nécessite un titrage précis.
• Lorsque vous travaillez avec des formes oxydées d'ApoA-I, notez que l'oxydation de la méthionine peut altérer la reconnaissance de l'épitope ; l'utilisation d'agents réducteurs et d'échantillons frais est recommandée.

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