Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-APLF pour WB, ELISA - Q8IW19

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'APLF

• L'APLF agit comme un chaperon d'histone essentiel pour la réparation des cassures simple et double brin de l'ADN.
  Références associées : PMID:17353262, PMID:17396150, PMID:21211721
• Il est recruté sur les sites de dommages à l'ADN en se liant aux chaînes ramifiées de poly-ADP-ribose, où il favorise l'éviction des histones et le recrutement de la variante d'histone MACROH2A1.
  Références associées : PMID:21211722, PMID:29905837, PMID:30104678
• L'APLF possède des activités endonucléase apprimidique-apyrimidique (AP) et exonucléase 3'-5' et peut introduire des coupures simples brins au niveau de l'hydroxyuracile et d'autres dommages à la base pyrimidique in vitro.
  Références associées : PMID:17353262, PMID:17396150
• Dans la voie de jonction d'extrémités non homologue (NHEJ), l'APLF collabore avec PARP3 pour retenir le complexe LIG4-XRCC4 sur la chromatine, accélérant la ligation de l'ADN.
  Références associées : PMID:21211721, PMID:23689425
• L'APLF régule négativement la pluripotence cellulaire en favorisant l'échange d'histones et est nécessaire à l'implantation de l'embryon lors de la transition épithélio-mésenchymateuse chez les femelles.
• Au niveau subcellulaire, l'APLF se localise dans le noyau, les chromosomes et le cytoplasme/cytosol, ce qui est cohérent avec ses fonctions de réparation de l'ADN et de régulation de la chromatine.
• Les motifs structuraux incluent un domaine FHA, des répétitions de doigt de zinc et des sites de phosphorylation et d'ADP-ribosylation, soulignant son rôle dans les réponses aux dommages à l'ADN dépendantes du signal.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot, attendez-vous à une bande proche de 57 kDa dans les échantillons d'origine humaine ; incluez un contrôle positif tel que l'immunogène recombinant (aa 200-380) pour confirmer la détection.
• Comme une réactivité croisée avec le rat a été observée, validez l'anticorps dans des lysats de cellules ou de tissus de rat si votre recherche implique des modèles rongeurs.
• Pour les applications ELISA, le revêtement avec le fragment recombinant d'APLF peut améliorer la spécificité du signal ; les conditions du dosage doivent être optimisées empiriquement.
• Étant donné la localisation nucléaire et cytoplasmique de l'APLF, envisagez une fractionnement subcellulaire pour enrichir la cible afin d'une détection plus sensible en WB.
• Puisque l'APLF est impliqué dans la réponse aux dommages à l'ADN, un traitement avec des agents génotoxiques peut augmenter le recrutement de la protéine sur la chromatine ; des expériences en série temporelle peuvent révéler des changements de localisation dynamiques.

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