Anticorps polyclonal Anti-APEX1/APE1 pour WB, IF/ICC, ELISA - P27695

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'APEX1/APE1

• APEX1 est une protéine multifonctionnelle avec deux activités principales : la réparation de l'ADN via la fonction endonucléase apurinique/apyrimidinique (AP) dans la réparation par excision de base (BER), et la régulation redox de facteurs de transcription tels que FOS/JUN (complexe AP-1). Références associées : PMID:11118054 PMID:11452037 PMID:15831793
• L'activité endonucléase AP catalyse l'incision hydrolytique du squelette phosphodiester au niveau des sites AP dans l'ADN, les hybrides ADN/ARN et l'ARN simple brin, générant une cassure simple brin avec des extrémités 5'-déoxyribose phosphate et 3'-hydroxyle. Références associées : PMID:15380100 PMID:16617147 PMID:18439621
• Il possède une activité exodésoxyribonucléase 3'-5' sur les nucléotides mal appariés et une activité ADN 3' phosphodiestérase, éliminant les lésions oxydatives telles que le phosphoglycolate et la 8-oxoguanine. Références associées : PMID:11832948 PMID:1719477 PMID:7516064
• APEX1 participe à la recombinaison de commutation de classe des immunoglobulines en traitant les sites AP au niveau des régions de commutation, conduisant à la formation de cassures double brin de l'ADN résolues par la jonction des extrémités non homologues.
• Il agit comme une endoribonucléase impliquée dans le contrôle qualité de l'ARN et le renouvellement des ARNm, y compris la régulation de la stabilité de l'ARNm de MYC. Références associées : PMID:19188445 PMID:19401441 PMID:21762700
• La protéine se localise dans plusieurs compartiments sous-cellulaires : noyau (incluant le nucléole et les speckles), cytoplasme, mitochondries et réticulum endoplasmique, ce qui reflète ses fonctions diversifiées.
• Les modifications post-traductionnelles clés incluent l'acétylation, la phosphorylation, la S-nitrosylation et l'ubiquitination ; l'acétylation au niveau des Lys-6/7 stimule l'activité du promoteur MDR1, contribuant à la résistance aux médicaments. Références associées : PMID:18809583
• APEX1 joue un rôle dans la déméthylation de l'ADN, contribuant à la régulation épigénétique de l'expression génique. Références associées : PMID:21496894

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est une protéine recombinante couvrant les acides aminés 1-318 de l'APEX1 humain (longueur totale), ce qui suggère que l'anticorps peut reconnaître à la fois les formes natives et dénaturées. Pour WB, une bande proche de 36 kDa est attendue ; utilisez des contrôles positifs appropriés (par exemple, lysats de cellules HeLa ou HEK293) et validez par extinction par ARNsi si nécessaire.
• Pour l'IF/ICC, attendez une coloration nucléaire et éventuellement cytoplasmique ou mitochondriale. Une co-coloration avec des marqueurs d'organites (par exemple, la lamine pour le noyau, MitoTracker pour les mitochondries) peut aider à confirmer la spécificité.
• Pour les applications ELISA, envisagez de revêtir avec la protéine APEX1 recombinante comme standard et de tester sur une gamme de concentrations pour optimiser la sensibilité.
• Compte tenu du rôle de l'APEX1 dans la voie BER, l'anticorps peut être utile pour détecter des changements d'expression dans des conditions de stress oxydatif ; incluez des contrôles pertinents (par exemple, cellules traitées au H₂O₂) pour mettre en corrélation avec les voies de réponse aux dommages de l'ADN.
• La réactivité croisée est validée pour l'homme ; pour les autres espèces, vérifiez l'homologie de séquence et réalisez des expériences pilotes.

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