Produits Antibodies Monoclonal Antibodies Anticorps monoclonal de lapin anti-APAF1 pour WB et ELISA - O14727
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Anticorps monoclonal de lapin anti-APAF1 pour WB et ELISA - O14727

Monoclonal Antibodies

Anticorps monoclonal de lapin anti-APAF1 pour WB et ELISA - O14727

Numéro d'article : CM0008325

Le prix varie en fonction de Spécifications et personnalisations


Application
WB, ELISA
Cross Reactivity
Humain, Souris
Protein Weight
38-142 kDa
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Spécifications et paramètres principaux du produit

Paramètre Valeur
Nom du produit [Validé par KD] APAF1 Rabbit mAb
Remarques / Alias CED4, APAF-1
Espèce Humain
ID du gène (Humain) 317
ID du gène 317
Immunogène Protéine de fusion recombinante contenant une séquence correspondant aux acides aminés 470-600 de l'APAF1 humain (NP_863651.1)
Source Lapin
Catégorie Anticorps monoclonaux
Application WB, ELISA
Réactivité croisée Humain, Souris
SWISS O14727
Poids de la protéine 38-142 kDa
Expédition Sac de glace

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'APAF1

  • APAF1 (facteur 1 activant les protéases apoptotiques), également appelé CED4 ou APAF-1, est codé par le gène APAF1 (KIAA0413) et existe sous plusieurs isoformes du fait de l'épissage alternatif.
  • La protéine agit comme composant central de l'apoptosome : l'APAF1 oligomérique médie l'activation autoprotéolytique dépendante du cytochrome c de la pro-caspase-9, activant ensuite la caspase-3 pour réaliser l'apoptose ; ce processus nécessite la liaison de l'ATP.
  • APAF1 est une protéine à domaines multiples contenant un domaine de recrutement de caspase N-terminal (CARD), un domaine central de liaison aux nucléotides et d'oligomérisation (NOD), et des régions de répétition WD40 C-terminales essentielles pour la liaison du cytochrome c.
  • Au niveau subcellulaire, l'APAF1 réside principalement dans le cytoplasme dans des conditions normales, et après induction de l'apoptose, il se transloque vers le complexe de l'apoptosome.
  • L'expression est ubiquitaire, avec les niveaux les plus élevés détectés dans la rate adulte, les leucocytes du sang périphérique, le cerveau fœtal, le rein et le poumon ; l'isoforme 1 est spécifiquement présente dans le cœur, le rein et le foie.
  • La protéine est soumise à la liaison de l'ATP/dATP et probablement à une régulation médiée par le calcium, comme l'indiquent les associations de mots-clés, et possède des répétitions WD essentielles pour les interactions protéine-protéine.
  • Mots-clés : Structure 3D, Épissage alternatif, Apoptose, Liaison à l'ATP, Calcium, Cytoplasme, Séquençage direct des protéines, Liaison aux nucléotides, Identification protéomique, Protéome de référence, Répétition, Répétition WD.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

  • L'immunogène correspond aux acides aminés 470-600 de l'APAF1 humain (région NOD centrale), ce qui permet la détection des variants de pleine longueur et des variants tronqués, mais la spécificité doit être vérifiée dans les modèles cellulaires concernés.
  • Pour le Western blot, considérez que l'APAF1 migre à plusieurs masses moléculaires (38-142 kDa) du fait de la diversité des isoformes et du clivage par les caspases ; le profil de bandes peut varier selon le type cellulaire et les stimuli apoptotiques.
  • Les applications ELISA peuvent être développées à l'aide d'une courbe étalon d'APAF1 recombinant ; incluez des contrôles positifs (par exemple, lysats de Jurkat traités à la staurosporine) et négatifs appropriés pour valider la spécificité du test.
  • La réactivité croisée avec l'APAF1 de souris est attendue sur la base de l'homologie de séquence, mais une confirmation empirique dans des tissus ou des lignées cellulaires de souris est recommandée.
  • L'optimisation de la dilution de l'anticorps, des conditions d'incubation et des réactifs de détection est conseillée pour chaque système expérimental.

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Fiche Technique du Produit

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