Anticorps monoclonal de lapin anti-AP2A1 pour WB, IF/ICC, ELISA - O95782

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation d’AP2A1

• AP2A1 code la sous-unité alpha-1 du complexe protéique adaptateur AP-2, un composant essentiel de l’endocytose médiée par la clathrine, qui assure la liaison entre la sélection du cargo et la formation des vésicules au niveau de la membrane plasmique.
• Le complexe AP-2 se lie directement à la clathrine et aux phosphoinositides membranaires, agissant comme un adaptateur majeur de la clathrine pour favoriser l’assemblage de vésicules recouvertes de clathrine (CCV) destinées à l’endocytose médiée par les récepteurs.
• AP2A1 reconnaît les signaux de tri, notamment les motifs YXXΦ et [ED]XXXL[LI], présents dans les queues cytoplasmiques des protéines cargo transmembranaires, permettant ainsi le recrutement sélectif des cargos dans les vésicules en formation.
• Lors de la potentialisation à long terme dans les neurones de l’hippocampe, AP-2 assure l’endocytose d’ADAM10, un processus essentiel à la plasticité synaptique et à la formation de la mémoire. Références associées : PMID:23676497
• La sous-unité alpha AP2A1 sert de plateforme d’échafaudage par l’intermédiaire de son domaine appendiculaire C-terminal, recrutant des protéines accessoires essentielles à la régulation de l’endocytose et au tri des cargos.
• Au niveau subcellulaire, AP2A1 se localise sur la membrane cellulaire et dans les puits recouverts de clathrine, conformément à son rôle dans l’initiation de la formation des vésicules endocytiques.
• AP2A1 est exprimée sous forme de plusieurs isoformes produites par épissage alternatif ; l’isoforme A est enrichie dans le cerveau antérieur, les muscles squelettiques et le cœur, tandis que l’isoforme B présente une distribution tissulaire étendue et est retrouvée dans les cancers du sein et de la prostate.
• La protéine est soumise à une phosphorylation, qui peut réguler son activité ou ses interactions dans les voies de trafic intracellulaire.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Lors de la réalisation d’un Western blot, prévoyez une bande autour de 108 kDa ; nous recommandons d’utiliser des lysats cellulaires totaux provenant de lignées cellulaires humaines, murines ou de rat comme témoins positifs.
• Pour l’immunofluorescence, optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation afin de détecter AP2A1 au niveau de la membrane plasmique et dans les puits recouverts ; un marquage en co-immunofluorescence avec la clathrine peut confirmer la localisation.
• L’anticorps peut être utilisé pour l’ELISA ; validez expérimentalement le tampon de revêtement, la concentration de l’antigène et le système de détection afin d’obtenir un rapport signal/bruit optimal.

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