Anticorps polyclonal de lapin anti-ANXA13 pour WB, IHC-P, ELISA - P27216

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l'ANXA13

• ANXA13 code l'annexine A13, un membre de la famille des annexines, des protéines de liaison aux phospholipides dépendantes du calcium. Deux isoformes sont produites par épissage alternatif : l'isoforme A (canonique) et un variant présentant une sensibilité distincte au calcium.
• L'isoforme A se lie de manière dépendante du calcium aux membranes enrichies en phosphatidylsérine ou en phosphatidylglycérol, avec une liaison semi-maximale à ~60 µM de Ca²⁺. Elle ne s'associe pas aux membranes dépourvues de phospholipides acides. Références associées : PMID:27676605 PMID:30610115
• L'isoforme alternative nécessite également du calcium pour interagir avec les membranes, mais présente une affinité plus faible, nécessitant ~320 µM de Ca²⁺ pour une liaison semi-maximale.
• Au niveau subcellulaire, ANXA13 se localise à la membrane apicale de la cellule, à la membrane cellulaire et dans les vésicules cytoplasmiques, ce qui est cohérent avec un rôle dans le trafic et l'organisation membranaires.
• ANXA13 est principalement exprimée dans les cellules épithéliales intestinales, avec une présence de la protéine détectée dans le côlon et le jéjunum, ce qui explique son alias « annexine spécifique de l'intestin » (ISA).
• La protéine subit une myristoylation (une modification lipidique) et appartient à la famille des répétitions d'annexine, caractérisée par des domaines conservés de liaison au calcium et aux phospholipides.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé est une protéine recombinante couvrant les acides aminés 1-316 de l'ANXA13 humaine (séquence canonique complète). Cela peut permettre la reconnaissance des deux isoformes, mais une vérification est recommandée.
• Pour le western blot (WB), le poids moléculaire prédit est d'environ 35 kDa. Utiliser des lysats cellulaires totaux ou des fractions membranaires provenant de lignées cellulaires intestinales (par ex. Caco-2, HT-29) ou des homogénats tissulaires (côlon, jéjunum).
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), les protocoles de récupération antigénique et la dilution de l'anticorps doivent être optimisés sur des tissus témoins positifs, tels que des coupes de côlon ou de jéjunum humains.
• Dans les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour la détection directe ou indirecte de l'ANXA13 recombinante ou native, avec des anticorps secondaires et des substrats colorimétriques ou fluorescents appropriés.
• Une réactivité croisée avec l'ANXA13 de souris et de rat est indiquée ; toutefois, les utilisateurs doivent effectuer une validation dans le système d'échantillon concerné afin de confirmer la spécificité.

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