Anticorps polyclonal anti-ANO1 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q5XXA6

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation d’ANO1

• ANO1 (anoctamine-1) est un membre de la famille des anoctamines, également désigné sous les noms DOG1, TMEM16A, ORAOV2 ou TAOS2. Il s’agit d’une protéine transmembranaire multipasse de 114 kDa, dotée d’un domaine de liaison au calcium conservé et de sites de N-glycosylation prédits.
• ANO1 fonctionne comme un canal chlorure activé par le calcium (CaCC), qui assure la sécrétion d’anions à travers les épithéliums et contribue à la contraction des muscles lisses ainsi qu’à l’activité pacemaker des cellules interstitielles de Cajal du tractus gastro-intestinal. Références associées : PMID:20056604, PMID:22178883, PMID:22946059
• Elle est nécessaire à l’activation de CFTR en favorisant la libération du calcium stocké dans le réticulum endoplasmique et en soutenant l’expression membranaire de CFTR. Références associées : PMID:28963502
• ANO1 contribue à la sécrétion basale et dépendante de l’ATP du mucus dans les voies respiratoires et l’intestin, et son activité a été associée à l’expression de la mucine MUC5AC induite par les interleukines et CLCA1, bien que les résultats soient contradictoires. Références associées : PMID:33026825, PMID:31732694
• La protéine se localise sur la membrane apicale des cellules et dans les compartiments présynaptiques des tissus concernés.
• ANO1 est largement exprimée, avec des niveaux plus élevés dans le foie, les muscles squelettiques et les muscles gastro-intestinaux ; elle est également détectée dans les épithéliums nasaux, les canaux collecteurs rénaux et les glandes sudoripares eccrines. Références associées : PMID:32487539, PMID:24913262, PMID:15215166, PMID:16906560, PMID:25220078
• Les principales modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation, la glycosylation et la formation de ponts disulfure ; l’épissage alternatif génère plusieurs isoformes.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre les résidus 400 à 500 de l’ANO1 humain, une région intracellulaire située entre les domaines transmembranaires. Cette conception peut permettre la reconnaissance des formes natives et dénaturées, ce qui convient aux applications WB et ELISA.
• Pour l’immunofluorescence/ICC, envisagez d’utiliser des étapes de perméabilisation afin de permettre à l’anticorps d’accéder à l’épitope intracellulaire.
• Lors de la réalisation d’un western blot, tenez compte du poids moléculaire prédit d’environ 114 kDa ; validez la spécificité de la bande à l’aide de lysats positifs et négatifs appropriés, par exemple de cellules épithéliales gastro-intestinales ou des voies respiratoires humaines et murines.
• Une réactivité croisée avec la souris est indiquée ; vérifiez-la dans votre système modèle spécifique, car l’ANO1 murine partage une forte identité de séquence dans la région correspondant à l’immunogène.
• Les dilutions de travail optimales doivent être déterminées expérimentalement pour chaque application.

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