Anticorps polyclonal de lapin anti-AMPKa1/AMPKa2 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q13131 / P54646

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'AMPK alpha-1

• L'AMPK alpha-1 est la sous-unité catalytique de la protéine kinase activée par l'AMP (AMPK) hétérotrimérique, un capteur énergétique central activé par l'augmentation du rapport AMP/ATP. Elle phosphoryle de nombreuses cibles en aval pour rétablir l'équilibre énergétique en stimulant les voies cataboliques et en inhibant les processus anaboliques.
  Références associées : PMID:17307971, PMID:17712357, PMID:24563466
• Dans le métabolisme lipidique, il phosphoryle directement et inactive l'acétyl-CoA carboxylase (ACACA) et la HMG-CoA réductase (HMGCR) pour supprimer la synthèse des acides gras et du cholestérol. Il favorise également la lipolyse en phosphorylant la choline kinase alpha (CHKA) sur les gouttelettes lipidiques.
  Références associées : PMID:34077757
• La kinase stimule l'absorption du glucose dans le muscle en améliorant la translocation de SLC2A4/GLUT4 vers la membrane plasmique, et module la glycolyse par phosphorylation de PFKFB2 et PFKFB3.
• L'AMPK alpha-1 agit comme régulateur transcriptionnel en phosphorylant des facteurs tels que CRTC2, FOXO3, p53/TP53 et l'histone H2B, couplant ainsi l'état énergétique aux programmes d'expression génique adaptatifs.
  Références associées : PMID:11518699, PMID:11554766, PMID:15866171
• En cas de limitation en nutriments, il supprime la signalisation mTORC1 en phosphorylant TSC2 et RPTOR, et initie l'autophagie en activant ULK1. Il phosphoryle également WDR24 et FNIP1 pour ajuster l'activité de mTORC1 en réponse au glucose et au stress énergétique.
  Références associées : PMID:14651849, PMID:18439900, PMID:20160076, PMID:36732624, PMID:37079666, PMID:21205641, PMID:28561066
• La protéine se localise dans le cytoplasme, le noyau et les endosomes tardifs, ce qui est cohérent avec ses fonctions diverses. Elle régule également la polarité cellulaire et phosphoryle un large ensemble de substrats dont CFTR, EEF2K, CASP6 et ALDH7A1.
  Références associées : PMID:17486097, PMID:12519745, PMID:20074060, PMID:32029622, PMID:31492851, PMID:40233740

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre une région N-terminale conservée (aa 5–280) partagée par AMPKa1 et AMPKa2, ce qui permet la réactivité croisée avec les orthologues de souris et de rat comme indiqué. Vérifiez la réactivité dans votre système spécifique avant des études à grande échelle.
• Pour le Western blot, attendez des bandes à environ 64 kDa (AMPKa1) et 65 kDa (AMPKa2). Optimisez la charge en protéines et les agents de blocage pour séparer les bandes proches ; incluez un lysat de contrôle positif.
• En immunofluorescence, l'AMPK présente une coloration à la fois cytoplasmique et nucléaire. Testez différents protocoles de fixation (par exemple méthanol contre formaldéhyde) et incluez des contrôles secondaires uniquement appropriés.
• Pour l'ELISA, envisagez d'utiliser le peptide immunogène ou les lysats de cellules entières pour générer une courbe d'étalonnage. Titrez l'anticorps pour déterminer les concentrations de travail optimales.

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