Ac pAb de lapin anti-AMPKa1/AMPKa2 pour WB, IHC-P, ELISA - Q13131 / P54646

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'AMPKa1/AMPKa2

• L'AMPK (protéine kinase activée par l'AMP) est un capteur d'énergie hétérotrimérique composé d'une sous-unité catalytique α (PRKAA1/α1 ou PRKAA2/α2), d'une sous-unité régulatrice β et d'une sous-unité γ. La sous-unité α1 est une sérine/thréonine kinase de 64 kDa critique pour l'homéostasie énergétique cellulaire.
• En réponse à une faible concentration d'ATP, l'AMPK active les voies cataboliques et inhibe les processus anaboliques tels que la biosynthèse des protéines, des glucides et des lipides, ainsi que la croissance et la prolifération cellulaires.
  Références associées :
  PMID:17307971, PMID:17712357, PMID:24563466
• L'AMPK phosphoryle directement des régulateurs de transcription (par exemple, CRTC2, FOXO3, histone H2B, HDAC5, p53) pour moduler l'expression des gènes et la structure de la chromatine en réponse au stress métabolique.
  Références associées :
  PMID:11518699, PMID:11554766, PMID:15866171
• Il régule négativement la signalisation mTORC1 en phosphorylant TSC2, RPTOR, WDR24 et FNIP1, inhibant ainsi la croissance cellulaire et favorisant l'autophagie dans des conditions de pauvreté en nutriments.
  Références associées :
  PMID:14651849, PMID:18439900, PMID:20160076, PMID:36732624, PMID:37079666
• L'AMPK favorise l'autophagie en phosphorylant et activant directement ULK1 et WDR45.
  Références associées :
  PMID:21205641, PMID:28561066
• L'AMPK est localisée dans le cytoplasme et le noyau, et peut s'associer aux endosomes tardifs, ce qui est cohérent avec ses rôles dans la signalisation métabolique et le trafic.
• Les caractéristiques post-traductionnelles clés incluent la phosphorylation (régulant son activité), la liaison aux nucléotides (AMP/ATP) et la glycosylation. L'enzyme est impliquée dans de multiples voies, notamment le métabolisme des lipides/stérols, l'autophagie, le rythme circadien et la signalisation Wnt.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (acides aminés 13-300) couvre une région hautement conservée de PRKAA1/PRKAA2, ce qui explique une réactivité croisée robuste avec les échantillons humains, de souris et de rat.
• Pour le Western blot, les isoformes d'AMPKα endogènes sont détectées sous forme de bandes autour de 62–65 kDa ; plusieurs bandes peuvent refléter un épissage différentiel ou des états de phosphorylation.
• L'IHC-P peut nécessiter une récupération de l'antigène (par exemple, tampon citrate pH 6,0) et une titration soigneuse ; l'inclusion de témoins tissulaires positifs et négatifs appropriés est recommandée.
• Les applications ELISA peuvent être établies en utilisant des standards de protéines ou de peptides recombinants ; associez à des anticorps secondaires appropriés et optimisez les conditions de revêtement.

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