Anticorps monoclonal anti-AMPK alpha 1/2 pour WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q13131 / P54646

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'AMPK alpha 1/2

• La sous-unité catalytique AMPK alpha-1 (PRKAA1) agit comme un capteur d'énergie central, activant les voies cataboliques et inhibant les processus anaboliques en réponse au stress énergétique cellulaire pour restaurer les niveaux d'ATP. Références associées : PMID:17307971 PMID:17712357 PMID:24563466
• Dans le métabolisme lipidique, l'AMPK phosphoryle directement et inactive l'acétyl-CoA carboxylase (ACACA/ACACB) et l'HMG-CoA réductase (HMGCR), supprimant ainsi la synthèse des acides gras et du cholestérol.
• L'AMPK régit la reprogrammation transcriptionnelle en phosphorylant des facteurs de transcription et des coactivateurs clés (par ex. CRTC2, FOXO3, SREBF1, PPARGC1A) et l'histone H2B, modulant l'expression des gènes métaboliques. Références associées : PMID:11518699 PMID:11554766 PMID:15866171
• Par la phosphorylation de RPTOR et TSC2, l'AMPK inhibe le complexe mTORC1, entraînant une downrégulation de la croissance et de la prolifération cellulaires, et promeut l'autophagie en cas de privation nutritionnelle. Références associées : PMID:14651849 PMID:18439900 PMID:20160076 PMID:21205641
• Au niveau sous-cellulaire, l'AMPK alpha-1 est localisé principalement dans le cytoplasme et le noyau, et est également détecté sur les endosomes tardifs, ce qui est cohérent avec ses divers rôles de signalisation.
• La protéine est soumise à une phosphorylation extensive sur de multiples résidus sérine/thréonine et, d'après l'identification protéomique, elle peut porter une glycosylation N-liée.
• L'AMPK alpha-1 présente également une activité tau-protéine kinase et peut phosphoryler MAPT/TAU en réponse au peptide bêta-amyloïde, bien que la signification in vivo reste incertaine.
• Cet anticorps reconnaît à la fois la sous-unité catalytique alpha-1 (codée par PRKAA1, UniProt Q13131) et la sous-unité alpha-2 très homologue (codée par PRKAA2, UniProt P54646), ce qui en fait un outil pan-AMPK-alpha.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les résidus 13–300 de l'AMPK alpha 1 humain, incluant le domaine kinase. Cette région est bien conservée chez l'homme, la souris et le rat, ce qui confirme la large réactivité croisée rapportée.
• Pour le Western blotting, attendez une bande majoritaire à environ 64 kDa. L'AMPK alpha-1 endogène est largement exprimé ; envisagez d'utiliser des lysats de lignées cellulaires comme HeLa, HEK293T, ou de tissus comme le foie et le muscle squelettique comme contrôles positifs.
• En immunofluorescence et en immunohistochimie, des signaux cytoplasmiques et nucléaires sont tous deux attendus. La localisation sous-cellulaire peut changer dans des conditions de stress spécifiques (par ex. privation de glucose, activateurs de l'AMPK), donc les protocoles de fixation et de perméabilisation doivent être optimisés pour le compartiment cible.
• Pour les tests ELISA, la nature monoclonale de cet anticorps garantit une cohérence d'un lot à l'autre ; cependant, les utilisateurs doivent valider les conditions optimales de revêtement et de détection dans leur système de test spécifique.

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