Anticorps polyclonal de lapin anti-AMBRA1 pour WB et ELISA - Q9C0C7

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation d'AMBRA1

• AMBRA1 est le composant de reconnaissance des substrats d'un complexe ligase E3 ubiquitine-protéine DCX (DDB1-CUL4-X-box), qui assure la polyubiquitination de protéines cibles impliquées dans la progression du cycle cellulaire et l'autophagie. Références associées : PMID:20921139, PMID:23524951, PMID:24587252
• Agit comme un régulateur maître en amont de la transition G1/S en reconnaissant les cyclines-D phosphorylées (CCND1, CCND2, CCND3) et en les ciblant pour une dégradation dépendante de l'ubiquitine, jouant ainsi le rôle de suppresseur de tumeur. Références associées : PMID:33854232, PMID:33854235, PMID:33854239
• Agit comme un régulateur clé de l'autophagie ; lors de l'induction de l'autophagie, il est libéré du cytosquelette afin de réaliser l'ubiquitination de BECN1 et ULK1 liée à « Lys-63 », renforçant l'activité de PIK3C3 et la stabilité d'ULK1 pour favoriser la formation des autophagosomes. Références associées : PMID:20921139, PMID:23524951
• Favorise la mitophagie en interagissant avec PRKN et les protéines de la famille LC3 afin de cibler les mitochondries endommagées vers les autophagosomes, et agit comme cofacteur de l'ubiquitination de MFN2 médiée par HUWE1. Références associées : PMID:21753002, PMID:25215947, PMID:30217973
• Indépendamment de sa fonction de ligase E3, AMBRA1 régule la stabilité de MYC et FOXO3 par des interactions avec la protéine phosphatase 2A (PPP2CA), entraînant la dégradation de MYC et la stabilisation de FOXO3, influençant ainsi la prolifération cellulaire et la différenciation des cellules T régulatrices. Références associées : PMID:25438055, PMID:25803737, PMID:30513302
• La localisation subcellulaire comprend le cytoplasme, le cytosquelette, le réticulum endoplasmique, les autophagosomes, les mitochondries, le noyau et les adhérences focales, ce qui reflète ses rôles multifonctionnels dans le trafic et la signalisation cellulaires.
• Il est modifié post-traductionnellement par méthylation et phosphorylation, et contient des répétitions WD ; il participe également à l'assemblage de chaînes de polyubiquitine liées à « Lys-63 », essentiel à la transduction des signaux.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 961–1208 d'AMBRA1 humain ; l'anticorps reconnaît donc probablement des épitopes situés dans cette région. En Western blot, une bande d'environ 143 kDa est attendue. Envisagez d'optimiser les conditions de blocage et de lavage afin de minimiser le bruit de fond.
• La réactivité croisée confirmée chez la souris rend cet anticorps adapté aux études sur des modèles murins ; toutefois, validez la détection dans le tissu ou le type cellulaire spécifique d'intérêt afin de garantir la spécificité et la sensibilité.
• Pour les applications ELISA, les conditions de pré-enrobage et les systèmes de détection doivent être optimisés empiriquement ; envisagez d'utiliser la protéine AMBRA1 recombinante ou des lysats cellulaires comme antigènes de revêtement.
• En raison de l'épissage alternatif, plusieurs isoformes d'AMBRA1 peuvent exister dans certains types cellulaires ; vérifiez le profil des bandes détectées par rapport aux contrôles connus dans votre système expérimental.
• Cet anticorps polyclonal peut être utilisé pour l'immunoprécipitation ou l'immunofluorescence après une validation supplémentaire ; une liaison non spécifique à d'autres protéines contenant des répétitions WD est peu probable, mais doit être écartée à l'aide de contrôles appropriés.

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