Anticorps polyclonal Anti-Alpha-2-Macroglobuline (A2M) pour WB - P01023

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Alpha-2-Macroglobuline (A2M)

• L'Alpha-2-macroglobuline (A2M) est une grande glycoprotéine plasmatique et membre de la famille des alpha-macroglobulines, également connue sous le nom de protéine 5 contenant le domaine de l'alpha-2-macroglobuline de type C3 et PZP (CPAMD5).
• L'A2M agit comme un inhibiteur de protéases à large spectre, capable d'inhiber les quatre classes de protéinases (sérine, cystéine, aspartique et métalloprotéases) grâce à un mécanisme unique de « piégeage ».
• La protéine contient une « région appât » avec des sites de clivage spécifiques ; lors du clivage protéolytique, un changement conformationnel piège la protéase, et une liaison thioester assure la liaison covalente à l'enzyme.
• Suite au clivage, la protéase piégée reste active contre les substrats de faible poids moléculaire mais présente une activité considérablement réduite contre les substrats de poids moléculaire élevé.
• L'A2M est sécrétée dans le plasma sanguin et fonctionne comme un collecteur clé de protéases extracellulaires, contribuant à la régulation de la coagulation, de la fibrinolyse et de l'inflammation.
• La protéine possède plusieurs caractéristiques structurelles, notamment un peptide signal, des ponts disulfure, des sites de glycosylation et une liaison thioester interne ; son poids moléculaire à l'état mature est d'environ 163 kDa.
• Des études structurelles tridimensionnelles ont élucidé les changements conformationnels sous-jacents au mécanisme de piégeage.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène a été conçu contre un fragment recombinant correspondant aux acides aminés 1155–1474, qui inclut le domaine de liaison au récepteur C-terminal ; à prendre en compte lors de l'évaluation de la réactivité de l'anticorps avec différentes conformations ou fragments de l'A2M.
• Pour le Western blot (WB), une bande à ~163 kDa est attendue dans des conditions réductrices ou non réductrices ; validez la détection dans le système d'échantillon pertinent et envisagez une pré-adsorption pour une haute spécificité.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), les méthodes appropriées de récupération de l'antigène et les conditions de fixation des tissus doivent être optimisées expérimentalement.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réagent de capture ou de détection ; le couplage avec un autre clone ou conjugué doit être validé dans le format d'essai spécifique.
• La réactivité croisée avec d'autres membres de la famille des alpha-macroglobulines (par exemple, la protéine de la zone de grossesse) n'a pas été testée ; confirmez la spécificité si nécessaire.

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