Anticorps monoclonal de lapin anti-alpha 1 Spectrine pour WB & ELISA - P02549

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'alpha 1 spectrine

• La protéine codée par le gène SPTA1 est la chaîne alpha de la spectrine, érythrocytaire 1, également connue sous le nom de alpha-spectrine érythroïde. C'est un composant structurel clé du cytosquelette de la membrane érythrocytaire.
• La spectrine est le constituant majeur du réseau cytosquelettique sous-jacent à la membrane plasmique des érythrocytes, où elle s'associe à la protéine 4.1 et à l'actine pour former une superstructure qui maintient la forme et l'élasticité de la cellule.
• La chaîne alpha de la spectrine contient de multiples répétitions de spectrine, un domaine SH3 et un motif de liaison au calcium de type EF-hand, contribuant à sa capacité à lier l'actine et à organiser le cytosquelette cortical.
• Au niveau subcellulaire, l'alpha 1 spectrine est localisée dans le cytoplasme, le cytosquelette et le cortex cellulaire, ce qui est cohérent avec son rôle de soutien de la membrane plasmique.
• Les mutations du gène SPTA1 sont associées à l'elliptocytose héréditaire et à la pyropoïkilocytose, soulignant sa fonction critique dans l'intégrité des érythrocytes.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation, qui peut réguler les interactions de la spectrine et la dynamique du cytosquelette.
• L'épissage alternatif du gène SPTA1 produit plusieurs isoformes avec des modèles d'expression spécifiques aux tissus.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant à une région interne (acides aminés 2300–2400), ce qui suggère que l'anticorps reconnaît un épitope linéaire. Pour le Western blot, envisagez d'utiliser un système de gel dénaturant et d'optimiser les conditions de transfert pour les protéines de poids moléculaire élevé (~280 kDa).
• Compte tenu du poids moléculaire prédit de 280 kDa, un gel de polyacrylamide à faible pourcentage (par exemple, 6–8 %) et des temps de transfert prolongés peuvent améliorer la détection. Incluez des marqueurs de poids moléculaire appropriés pour confirmer la taille de la bande.
• La réactivité croisée de l'anticorps avec l'humain, la souris et le rat indique une conservation de la séquence de l'épitope. Validez les performances de l'anticorps dans des lysats d'échantillons pertinents (par exemple, érythrocytes ou lignées cellulaires érythroleucémiques) pour confirmer la spécificité.
• Pour les applications ELISA, la conception de l'immunogène peptidique prend en charge les formats de dosage direct ou indirect. Optimisez les conditions de revêtement et utilisez de l'alpha 1 spectrine recombinante ou purifiée comme témoin positif, si disponible.

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