Anticorps polyclonal de lapin anti-ALOX5 pour WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P09917

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'ALOX5

• ALOX5 code pour la 5-lipoxygénase des acides gras polyinsaturés (également appelée arachidonate 5-lipoxygénase, 5-LO, 5-lipoxygénase), une enzyme clé dans la biosynthèse des leucotriènes, de puissants médiateurs inflammatoires, via l'oxygénation de l'acide arachidonique. Références associées : PMID:19022417, PMID:21233389, PMID:22516296
• Elle convertit l'arachidonate en 5-hydroperoxyeicosatétraénoate (5-HPETE) puis en leucotriène A4 (LTA4), et peut également produire du 8-HPETE et du 12-HPETE. Références associées : PMID:23246375
• ALOX5 présente une activité lipoxine synthase, convertissant le (15S)-HETE en un tétraène conjugué, et métabolise d'autres acides gras polyinsaturés pour former des médiateurs spécialisés de la résolution (SPM) comme les lipoxines et les résolvines, contribuant aux réponses anti-inflammatoires. Références associées : PMID:17114001, PMID:21206090, PMID:31664810
• Peut également participer à la migration des cellules dendritiques, à la cicatrisation, à l'adhésion des monocytes et à l'immunité humorale adaptative ; interagit directement avec CD40 via PIK3R1 pour produire des ROS dans les cellules B. Références associées : PMID:21200133
• Elle joue un rôle dans l'homéostasie du glucose, la régulation de la sécrétion d'insuline et la résistance à l'insuline induite par l'acide palmitique via l'AMPK, et influence la minéralisation osseuse et la différenciation des adipocytes.
• Au niveau subcellulaire, ALOX5 se trouve dans le cytoplasme, la matrice et la membrane nucléaires, la région périnucléaire, le cytosol, l'enveloppe nucléaire et l'espace intermembranaire.
• C'est une enzyme liant le calcium et le fer, classée comme une dioxygénase et une hydrolase, avec des épissages alternatifs et des modifications de phosphorylation.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond à la région N-terminale (aa 1–200) de l'ALOX5 humaine ; l'anticorps peut détecter la forme pleine longueur et éventuellement des fragments N-terminaux. Validez la spécificité dans votre système d'échantillonnage.
• La taille de bande prédite est d'environ 78 kDa en Western blot ; envisagez d'utiliser des marqueurs de poids moléculaire appropriés et des contrôles de chargement. Optimisez les tampons de lyse et les inhibiteurs de protéases pour les fractions membranaires et nucléaires.
• Pour l'immunohistochimie (IHC‑P), testez les méthodes de démasquage antigénique (tampon citrate ou EDTA) et le titrage de l'anticorps. Incluez des contrôles tissulaires positifs et négatifs pertinents.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), une perméabilisation avec du Triton X‑100 peut être nécessaire pour accéder aux pools nucléaires et cytoplasmiques.
• En tant qu'anticorps polyclonal, la cohérence entre les lots doit être vérifiée pour les dosages quantitatifs critiques. Envisagez un blocage par peptide ou une extinction par siRNA pour confirmer la spécificité.

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