Anticorps polyclonal de lapin anti-ALOX12B pour WB, ELISA - O75342

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ALOX12B

• L'ALOX12B (ARCI2, 12R-LOX) est une arachidonate 12-lipoxygénase de type 12R, également connue sous le nom de lipoxygénase 12 de type épidermique, appartenant à la famille des lipoxygénases.
• Catalyse l'incorporation régio- et stéréo-spécifique d'oxygène moléculaire dans les acides gras polyinsaturés libres et estérifiés pour générer des hydroperoxydes lipidiques, qui sont ensuite réduits en dérivés hydroxy.
  Références associées :
  PMID:21558561 PMID:9618483 PMID:9837935
• Dans la peau, agit en amont de l'ALOXE3 sur la fraction linoléate des céramides ω-hydroxyacyl-sphingosine (EOS) estérifiés pour produire un dérivé époxy-cétone, une étape critique pour la fixation covalente des ω-hydroxycéramides aux protéines de l'enveloppe des cornéocytes.
  Références associées :
  PMID:21558561
• Cette cascade enzymatique est essentielle pour former l'enveloppe lipidique des cornéocytes et établir la barrière de perméabilité épidermique, prévenant ainsi une perte d'eau trans-épidermique excessive.
  Références associées :
  PMID:21558561
• Peut également réguler l'expression des mucines des voies respiratoires, suggérant un rôle au-delà de la peau.
  Références associées :
  PMID:22441738
• Exprimé dans les lymphocytes B, les follicules pileux, les kératinocytes du prépuce, la peau adulte et les tissus psoriasiques (spécificité tissulaire UniProt).
• Se localise dans le cytoplasme, principalement dans la région périnucléaire.
• Mots-clés fonctionnels : Dioxygénase, liaison au fer, lyase, métabolisme lipidique, oxydoréductase ; associé à l'ichtyose en cas de mutation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène englobe les acides aminés N-terminaux 1-250 de l'ALOX12B humain ; gardez à l'esprit que les épitopes peuvent être partiellement enfouis si la protéine adopte une conformation repliée, ce qui pourrait affecter la détection dans des conditions natives.
• Pour le Western blot (WB), une bande autour de 80 kDa est attendue ; validez la spécificité de l'anticorps en utilisant des lysats témoins positifs et négatifs (par exemple, cellules surexprimant l'ALOX12B par rapport à un knockout).
• Pour l'ELISA, testez plusieurs concentrations d'antigène de revêtement et de dilutions d'anticorps pour optimiser le rapport signal sur bruit ; la protéine ALOX12B recombinante peut servir de standard.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec l'ALOX12B de souris et de rat ; cependant, l'homologie de séquence dans la région de l'immunogène doit être vérifiée et la réactivité croisée doit être confirmée dans le tissu de l'espèce concernée.
• Dans la recherche cutanée, l'expression de l'ALOX12B est plus élevée dans les kératinocytes différenciés ; envisagez d'utiliser des modèles équivalents épidermiques ou des échantillons psoriasiques pour les études fonctionnelles.

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