Anticorps monoclonal de lapin anti-ALKBH5 pour WB, ELISA - Q6P6C2

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ALKBH5

• L'ALKBH5 catalyse la déméthylation oxydative de la m6A sur l'ARN, une réaction dépendante de l'oxygène moléculaire, de l'alpha-cétoglutarate et du fer, permettant d'inverser la modification m6A sur l'ARNm.
  Références associées : PMID:21264265 PMID:23177736 PMID:24489119
• Grâce à son activité déméthylase, l'ALKBH5 module le traitement, la traduction et l'exportation de l'ARNm, ce qui en fait un régulateur essentiel de l'épitranscriptome.
  Références associées : PMID:23177736 PMID:34048572 PMID:36944332
• L'ALKBH5 est également capable de déméthyler la N(6)-méthyladénosine sur l'ADN monobrin in vitro, ce qui suggère un potentiel de substrats plus large.
  Référence associée : PMID:24616105
• Il joue un rôle essentiel dans la spermatogenèse, étant nécessaire aux phases méiotiques tardives et haploïdes ; la déméthylation m6A par l'ALKBH5 dans les spermatocytes et les spermatides rondes garantit un épissage correct et la production d'ARNm avec des 3'-UTR plus longs dans les cellules germinales mâles.
• L'ALKBH5 participe à l'assemblage des paraspeckles, une organelle nucléaire sans membrane, par séparation de phases liquide-liquide, son activité déméthylase sur l'ARN non codant NEAT1 étant essentielle à ce processus.
  Références associées : PMID:37369679 PMID:37474102
• En tant que régulateur négatif du développement des lymphocytes T, l'ALKBH5 inhibe la prolifération des lymphocytes T gamma-delta en déméthylant les transcrits JAG1 et NOTCH2, et supprime le recrutement des lymphocytes T régulateurs par déstabilisation de l'ARNm CCL28.
• Au niveau sous-cellulaire, l'ALKBH5 se localise dans les speckles nucléaires et le nucléoplasme, ce qui est cohérent avec ses fonctions dans le traitement de l'ARN et la dynamique des corps nucléaires.
• L'acétylation, la phosphorylation et la conjugaison à l'ubiquitine font partie des modifications post-traductionnelles répertoriées pour l'ALKBH5, qui peuvent réguler sa stabilité et son activité.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (acides aminés 66 à 394 de l'ALKBH5 humaine) couvre une grande partie de la protéine ; nous recommandons de vérifier la spécificité dans des modèles de knock-out ou de knock-down pour les applications critiques.
• Pour le Western blotting, une bande d'environ 44 kDa est attendue ; utilisez des lysats de tissus présentant une forte expression d'ALKBH5 (poumon, testicule par exemple) comme contrôles positifs.
• En ELISA, optimisez la concentration de l'antigène de revêtement et la dilution de l'anticorps pour obtenir une détection linéaire et minimiser le bruit de fond.
• Du fait de la localisation nucléaire de l'enzyme, vérifiez que les protocoles de lyse et d'extraction sont adaptés lors de la préparation des lysats pour la détection.

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