Anticorps polyclonal de lapin anti-ALKBH1 pour WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q13686

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation d'ALKBH1

• ALKBH1 est une dioxygénase des acides nucléiques qui agit sur l'ADN et les ARNt, nécessitant de l'oxygène moléculaire, de l'alpha-cétoglutarate et du fer comme cofacteurs. Références associées : PMID:18603530 PMID:27497299
• Elle fonctionne principalement comme une déméthylase des ARNt, éliminant la N1-méthyladénine de divers ARNt, avec une préférence pour la position 58 (m1A58) dans la boucle T, régulant ainsi l'initiation et l'élongation de la traduction. Références associées : PMID:27745969
• Dans les mitochondries, ALKBH1 oxyde l'ARNt mitochondrial de la méthionine (mt-tRNA(Met)) au niveau de la cytosine(34) en 5-formylcytosine, élargissant la reconnaissance des codons pour permettre la lecture de AUA en plus de AUG. Références associées : PMID:27497299
• ALKBH1 déméthyle également la N6-méthyladénine de l'ADN, en particulier au niveau des éléments répétitifs L1 dans les cellules souches embryonnaires, contribuant ainsi à leur silençage. Références associées : PMID:30017583 PMID:30392959
• ALKBH1 présente une activité de lyase de l'ADN, clivant les sites apuriques/apyrimidiniques de l'ADN, ce qui génère des adduits covalents protéine-ADN ; cette activité ne nécessite pas d'alpha-cétoglutarate. Références associées : PMID:19959401 PMID:23577621
• La protéine se localise à la fois dans le noyau et dans les mitochondries.
• ALKBH1 est exprimée de manière ubiquitaire dans les tissus humains.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 110-389 de l'ALKBH1 humain, une région englobant le domaine catalytique. Cette conception peut conférer une forte réactivité envers la protéine entière.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est de 44 kDa. Des bandes supplémentaires peuvent apparaître en raison de l'épissage alternatif, de modifications post-traductionnelles ou de la détection d'homologues tels que Alkbh1 murin.
• En immunofluorescence/immunocyt chimie, prévoyez un marquage dans les compartiments nucléaire et mitochondrial, conformément à la double localisation d'ALKBH1.
• Lors d'une immunoprécipitation, notez qu'ALKBH1 interagit avec les acides nucléiques ; incluez un traitement par nucléase si nécessaire.
• Les performances en ELISA doivent être validées à l'aide de l'antigène recombinant ou de lysats cellulaires/tissulaires pertinents ; tenez compte des effets de matrice dans les échantillons complexes.
• Une réactivité croisée avec l'ALKBH1 murin est attendue, mais confirmez l'identité de la séquence dans la région de l'immunogène pour les autres espèces si nécessaire.

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