Anticorps polyclonal de lapin anti-phosphatase alcaline (ALPL) pour WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P05186

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la phosphatase alcaline (ALPL)

• La phosphatase alcaline, isoenzyme non spécifique de tissu (ALPL), également connue sous le nom de phosphatase alcaline foie/os/rein, est codée par le gène ALPL et appartient à la famille des phosphatases alcalines.
• Elle fonctionne comme une hydrolase avec une large spécificité de substrat, déphosphorylant des composés tels que le pyrophosphate inorganique (PPi), le pyridoxal 5′-phosphate (PLP) et la N-phosphocréatine. Références connexes : PMID:12162492, PMID:2220817
• Essentielle pour la minéralisation squelettique et dentaire en hydrolysant le PPi extracellulaire, un inhibiteur de la minéralisation, en phosphate, favorisant ainsi la formation de cristaux d'hydroxyapatite. Références connexes : PMID:23688511, PMID:25982064
• Catalyse la déphosphorylation du PLP en pyridoxal, la forme transportable de la vitamine B6, essentielle pour la synthèse des neurotransmetteurs dans le cerveau. Références connexes : PMID:20049532, PMID:2220817
• Se localise à la membrane cellulaire via une ancre GPI, et s'associe également aux vésicules extracellulaires, à la membrane mitochondriale et à l'espace intermembranaire, médiant le métabolisme localisé du phosphate.
• Modifiée post-traductionnellement par glycosylation, ponts disulfure et sites de liaison pour le zinc et le magnésium, qui sont essentiels pour son activité catalytique.
• Les mutations du gène ALPL sont liées à l'hypophosphatasie, une maladie osseuse métabolique, reflétant son rôle clé dans la biominéralisation.
• De plus, l'ALPL peut déphosphoryler des produits microbiens tels que les lipopolysaccharides (LPS), suggérant un rôle dans la modulation des réponses immunitaires innées. Références connexes : PMID:28448526

Conseils expérimentaux et techniques

• Pour le transfert Western (Western blotting), envisagez une dilution de départ de 1:500–1:2000 et validez sur des lysats de tissus humains, de souris ou de rat exprimant l'ALPL, tels que l'os, le foie ou le rein.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), la récupération d'antigène avec du tampon citrate peut améliorer le signal ; testez sur des tissus connus comme positifs tels que les ostéoblastes ou les hépatocytes.
• En immunofluorescence (IF-P), incluez une perméabilisation appropriée et validez la colocalisation avec des marqueurs de la membrane ou des vésicules extracellulaires.
• Pour ELISA, associez à un anticorps de détection apparié et testez avec la protéine recombinante ALPL ou des échantillons biologiques contenant une activité phosphatase alcaline.
• L'immunogène s'étend sur les acides aminés 120–260, se situant dans le domaine catalytique ; l'anticorps peut reconnaître les formes liées à la membrane et solubles.
• En raison de la forte homologie entre les espèces, une réactivité croisée avec la souris et le rat est attendue, mais validez toujours dans votre système d'échantillon spécifique.

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