Anticorps polyclonal anti-ALK pour WB, IF/ICC, ELISA - Q9UM73

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation d’ALK

• ALK (kinase du lymphome anaplasique, également connue sous le nom de CD246 ou ALK1) est un récepteur neuronal à activité tyrosine kinase, essentiellement et transitoirement exprimé dans des régions spécifiques des systèmes nerveux central et périphérique, où il joue un rôle crucial dans la genèse et la différenciation du système nerveux.
  Références associées : PMID:11121404, PMID:11387242, PMID:16317043
• ALK agit comme une protéine clé de la minceur : dans les neurones hypothalamiques, elle contrôle la dépense énergétique en régulant négativement la lipolyse du tissu adipeux blanc et le tonus sympathique afin d’ajuster l’homéostasie énergétique (par analogie).
• Après liaison à son ligand (en particulier ALKAL2), ALK se dimérise et s’autophosphoryle dans son domaine kinase intracellulaire, déclenchant l’activation en aval de la voie des protéines kinases activées par les mitogènes (MAPK) et d’autres cascades de signalisation.
  Références associées : PMID:30061385, PMID:33411331, PMID:34646012, PMID:34819673
• ALK recrute et phosphoryle les protéines adaptatrices IRS1, SHC1, FRS2 et CBL, entraînant l’activation de NF-kappa-B et de la sérine/thréonine kinase AKT, ce qui favorise la survie et la prolifération cellulaires.
  Références associées : PMID:15226403, PMID:16878150, PMID:12122009
• ALK est localisée dans la membrane cellulaire (annotation UniProt) et est exprimée dans le cerveau, le système nerveux central, l’intestin grêle et les testicules, mais pas dans les cellules lymphoïdes normales.
• ALK est classée comme un proto-oncogène et est associée à des réarrangements chromosomiques dans le cancer. Il s’agit d’une glycoprotéine dotée d’une seule hélice transmembranaire et d’un domaine tyrosine kinase intracellulaire.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond aux résidus 1521–1620 situés près de l’extrémité C-terminale de l’ALK humain (NP_004295.2). Pour le Western blot, une bande d’environ 176 kDa est attendue ; utilisez des marqueurs de poids moléculaire appropriés et validez avec une lignée cellulaire ou un lysat tissulaire connu pour être positif à ALK.
• Pour l’immunofluorescence (IF/ICC), optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation afin de détecter l’ALK localisée dans la membrane ; envisagez d’utiliser des lignées cellulaires dont l’expression d’ALK est confirmée.
• Dans les applications ELISA, la nature polyclonale peut fournir une couverture étendue des épitopes, mais les conditions de l’essai et les méthodes de revêtement doivent être déterminées expérimentalement.
• Lors de l’utilisation d’échantillons murins, confirmez l’homologie de séquence de la région immunogène, car une réactivité croisée est déclarée, mais les performances de l’anticorps peuvent varier.
• Comme pour tout anticorps polyclonal, une variabilité entre lots peut survenir ; l’inclusion de contrôles positifs et négatifs appropriés est recommandée pour chaque expérience.

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