Anticorps monoclonal de lapin anti-ALIX pour WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q8WUM4

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'ALIX

• ALIX (protéine interagissant avec la mort cellulaire programmée 6), également connu sous le nom d'AIP1, HP95, DRIP4 et MCPH29, est codé par le gène PDCD6IP et existe sous plusieurs isoformes dues à l'épissage alternatif.
• C'est une protéine VPS de classe E essentielle à la biogenèse des corps multivésiculaires (MVB), concentrant et triant le cargo pour la formation de vésicules intraluminales via la voie ESCRT. Références associées : PMID:14739459
• ALIX se lie au phospholipide lysobisphosphatidique (LBPA) sur les membranes internes des MVB et sert d'adaptateur pour un sous-ensemble de protéines ESCRT-III, comme CHMP4B.
• La protéine est nécessaire à la cytokinèse, fonctionnant dans l'étape d'abscission via des événements de fission membranaire topologiquement équivalents. Références associées : PMID:17556548 PMID:17853893 PMID:18641129
• En concert avec SDC1/4 et SDCBP, ALIX régule la biogenèse des exosomes, impactant la communication intercellulaire. Références associées : PMID:22660413
• Au niveau subcellulaire, ALIX se localise dans le cytosol, les mélanosomes, les centrosomes, les jonctions serrées, l'anneau du corps intermédiaire, et est sécrété dans les exosomes extracellulaires.
• Il participe aux interactions hôte-virus, facilitant le bourgeonnement du VIH-1 en interagissant avec CHMP4B, et peut jouer des rôles dans l'apoptose et le maintien de la barrière épithéliale.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation, la phosphorylation et la méthylation, influençant ses activités multifonctionnelles.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène utilisé pour cet anticorps est une protéine recombinante ; considérez que l'anticorps peut reconnaître l'ALIX natif et dénaturé selon l'application.
• Pour le Western blot (WB), validez dans votre système d'échantillon spécifique et optimisez la quantité de protéine chargée pour détecter la bande à 96 kDa ; notez que les modifications post-traductionnelles peuvent provoquer de légers décalages de mobilité.
• Dans les expériences d'IF/ICC, les méthodes de fixation et de perméabilisation peuvent affecter la coloration des différents pools d'ALIX (cytosolique, centrosomal, corps intermédiaire) ; envisagez de tester plusieurs protocoles.
• Pour l'IP, confirmez la compatibilité de l'anticorps avec votre tampon de lyse et assurez l'enrichissement de la cible en exécutant des contrôles parallèles.
• Lors de l'utilisation de l'ELISA, incluez des contrôles positifs (protéine recombinante) et négatifs appropriés pour évaluer la sensibilité et la spécificité.

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