Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-ALG13 pour WB, ELISA - Q9NP73

Spécifications et Paramètres Clés du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation d'ALG13

• ALG13 est la sous-unité catalytique du complexe UDP-N-acétylglucosamine transférase, également connu sous le nom d'asparagine-linked glycosylation 13 homolog ou glycosyltransferase 28 domain-containing protein 1. Il médie la deuxième étape de la biosynthèse de l'oligosaccharide lié au dolichol sur la face cytoplasmique du réticulum endoplasmique.
• Avec son partenaire obligatoire ALG14, ALG13 forme un complexe dimérique qui transfère un N-acétylglucosamine (GlcNAc) lié en β1,4 à partir de l'UDP-GlcNAc vers le GlcNAc-pyrophosphatedolichol, générant le N,N′-diacétylchitobiosyl diphosphodolichol. Cet intermédiaire est ensuite allongé par ALG1 et d'autres glycosyltransférases.
• Le complexe ALG13/ALG14 est ancré à la membrane du réticulum endoplasmique, où le précurseur oligosaccharidique lié au dolichol est assemblé avant d'être retourné dans la lumière du RE pour un traitement ultérieur et un transfert final aux polypeptides naissants.
• Bien qu'annoté comme une enzyme multifonctionnelle potentielle sur la base de motifs de séquence (domaines thiol protéase, hydrolase), aucune activité glycosyltransférase ou déubiquitinylase n'a été détectée pour ALG13 en dehors de son rôle dans le transfert de GlcNAc. Ses activités biochimiques supplémentaires, si elles existent, restent mal caractérisées.
• Les mutations du gène ALG13 sont associées au trouble congénital de la glycosylation de type Is (CDG1S) et aux encéphalopathies épileptiques du nourrisson (DEE36, EIEE36), reflétant l'importance critique de cette enzyme dans le neurodéveloppement normal et la N-glycosylation globale des protéines.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes d'ALG13, et la protéine est soumise à l'ubiquitination (voie de conjugaison Ubl), ce qui peut réguler sa stabilité ou sa fonction.

Guide Expérimental et Conseils Techniques

• L'immunogène utilisé est un peptide synthétique couvrant les résidus 100–167 de l'ALG13 humain (isoforme NP_001311219.1). Cet épitope est conservé dans l'ALG13 de souris, ce qui explique la réactivité croisée observée avec les échantillons murins.
• Pour le Western blot, validez la spécificité de l'anticorps en incluant des contrôles positifs tels que des lignées cellulaires humaines ou murines connues pour exprimer ALG13, et envisagez des expériences de knockdown par siRNA ou de surexpression pour confirmer la bande à ~126 kDa.
• Pour étudier le complexe fonctionnel ALG13/ALG14, envisagez des co-immunoprécipitations ou des tests de ligation de proximité couplés à la détection des deux sous-unités.
• Dans les applications ELISA, utilisez la protéine ALG13 recombinante ou le peptide immunisant comme antigène de revêtement pour établir des courbes standards, et titrez l'anticorps de manière appropriée pour un rapport signal/bruit optimal.
• Étant donné qu'ALG13 est une protéine associée à la membrane, assurez-vous que les tampons de lyse contiennent des détergents adéquats (par exemple, 1% de Triton X-100 ou NP-40) pour solubiliser efficacement la fraction membranaire du RE.

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