Anti-AKT1S1/PRAS40 Lapin pAb pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q96B36

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'AKT1S1/PRAS40

• AKT1S1/PRAS40 (substrat proline-riche 1 d'AKT1) est également connu sous le nom de substrat proline-riche d'AKT de 40 kDa (PRAS40) et est codé par le gène AKT1S1, produisant une protéine d'environ 27 kDa (UniProt : Q96B36) ; l'épissage alternatif génère de multiples variants de transcrits.
• Il agit comme un régulateur négatif de mTORC1, inhibant l'activité kinase en occupant le site de recrutement des substrats de MTOR (PubMed:17277771, PubMed:17386266, PubMed:17510057, PubMed:29236692).
  Références associées : PMID:17277771, PMID:17386266, PMID:17510057, PMID:29236692
• Lors d'une stimulation par l'insuline ou les nutriments, AKT1S1 devient hyperphosphorylé et se dissocie de mTORC1, levant ainsi l'inhibition et permettant à la signalisation mTORC1 de se poursuivre (PubMed:17386266, PubMed:18372248).
  Références associées : PMID:17386266, PMID:18372248
• La fonction inhibitrice d'AKT1S1 est elle-même régulée par phosphorylation et liaison subséquente aux protéines 14-3-3, ce qui favorise sa dissociation du complexe (PubMed:16174443, PubMed:18372248).
  Références associées : PMID:16174443, PMID:18372248
• La protéine est principalement localisée dans le cytoplasme/cytosol, ce qui correspond à son rôle dans la modulation de l'activité de mTORC1 au niveau des sites lysosomaux et cytosoliques.
• AKT1S1 est largement exprimé dans les tissus, avec les niveaux les plus élevés dans le foie et le cœur ; son expression est souvent élevée dans les lignées cellulaires cancéreuses (par exemple, A-549, HeLa) par rapport aux lignées normales.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation sur de multiples résidus sérine/thréonine et la méthylation ; ces événements influencent son activité et ses interactions.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène (peptide synthétique, aa 150-256) cible une région centrale de l'AKT1S1 humain ; assurez-vous que votre échantillon exprime la protéine pleine longueur ou des isoformes contenant cet épitope pour éviter les faux négatifs.
• Pour le Western blot, AKT1S1 migre à environ 27 kDa ; envisagez d'utiliser un contrôle positif comme un lysat HeLa ou A-549, et validez la spécificité de la bande avec des peptides de blocage ou un siRNA si nécessaire.
• En IHC-P et IF/ICC, notez la localisation cytoplasmique d'AKT1S1 ; une perméabilisation et une récupération d'antigène peuvent être nécessaires pour une détection optimale.
• Cet anticorps a été rapporté comme adapté pour l'ELISA ; effectuez des titrages en damier pour déterminer les conditions optimales de revêtement et de détection pour votre configuration d'essai spécifique.

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