Anticorps polyclonal Anti-AKT1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P31749

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'AKT1

• L'AKT1 (PKB/PKB alpha/RAC-PK-alpha) est une sérine/thréonine kinase et l'une des trois isoformes AKT étroitement apparentées (AKT1, AKT2, AKT3) qui régulent des processus cellulaires fondamentaux, notamment le métabolisme, la prolifération, la survie, la croissance et l'angiogenèse. Références connexes : PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• L'AKT1 phosphorylate un large éventail de substrats pour contrôler la signalisation de l'insuline, le métabolisme du glucose et la croissance cellulaire. Elle phosphorylate TSC2, activant mTORC1 pour favoriser la synthèse des protéines et la croissance cellulaire, et phosphorylate les facteurs de transcription FOXO, entraînant leur séquestration cytoplasmique et l'inhibition de l'expression des gènes pro-apoptotiques. Références connexes : PMID:12150915, PMID:12172553, PMID:10358075, PMID:21432781
• L'AKT1 est critique pour la survie cellulaire : elle phosphorylate MAP3K5/ASK1 au niveau de la Ser-83 pour inhiber l'apoptose induite par le stress oxydatif et phosphorylate BAD pour bloquer sa fonction pro-apoptotique. Elle active également CREB1, améliorant la transcription des gènes anti-apoptotiques tels que BCL2 et MCL1. Références connexes : PMID:11154276, PMID:10926925, PMID:9829964
• L'AKT1 joue un rôle clé dans l'absorption de glucose médiée par l'insuline en favorisant la translocation du transporteur SLC2A4/GLUT4 vers la membrane plasmique et en inhibant GSK3, stimulant ainsi la synthèse du glycogène.
• L'AKT1 se localise dans le cytoplasme, le noyau, la membrane cellulaire et l'espace intermembranaire mitochondrial, ce qui lui permet de moduler la signalisation à plusieurs sites sous-cellulaires.
• Exprimée de manière ubiquitaire dans les tissus humains, les niveaux de protéine AKT1 augmentent de l'état normal à l'état malin dans le cancer de la prostate, et sa forme phosphorylée Tyr-176 est élevée lors de la progression du cancer du sein.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique issu des acides aminés 100-200, une région centrale qui peut offrir une bonne accessibilité. Envisagez d'utiliser cet anticorps pour détecter la protéine AKT1 totale dans divers lysats.
• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit est d'environ 56 kDa. Une bande à cette taille est attendue dans les échantillons humains, de souris et de rat compte tenu de la réactivité croisée signalée. Vérifiez le marqueur de poids moléculaire et utilisez des témoins de chargement appropriés.
• Cet anticorps polyclonal convient à l'immunohistochimie (IHC-P) et à l'immunofluorescence (IF/ICC). Optimisez les méthodes de récupération de l'antigène pour les tissus inclus en paraffine et incluez des témoins négatifs appropriés pour évaluer la spécificité.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réagent de capture ou de détection. Validez empiriquement la concentration de travail optimale en utilisant le peptide immunogène comme témoin positif.
• L'activation de l'AKT1 dépendant de son état de phosphorylation (par exemple, Thr-308, Ser-473), envisagez de combiner avec des anticorps spécifiques de l'activation pour les études de signalisation.
• En raison de la similitude de séquence entre les isoformes AKT, vérifiez la spécificité de l'isoforme dans votre système expérimental.

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