Anti-AKT1 (phospho T308) mAb de lapin pour WB, ELISA - P31749

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'AKT1

• L'AKT1 est un membre de la famille des sérine/thréonine kinases AKT, qui comprend également AKT2 et AKT3, et elle régule des processus cellulaires critiques tels que le métabolisme, la prolifération, la survie, la croissance et l'angiogenèse (PubMed:11882383, PubMed:15526160, PubMed:15861136). Références associées : PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• L'AKT1 favorise la survie cellulaire en phosphorylant MAP3K5 sur la Ser-83, ce qui inhibe l'activité kinase de MAP3K5 en réponse au stress oxydatif, empêchant ainsi l'apoptose (PubMed:11154276). Références associées : PMID:11154276
• Dans la signalisation de l'insuline, l'AKT1 médie la synthèse des protéines et la croissance cellulaire en phosphorylant TSC2 sur la Ser-939 et la Thr-1462, conduisant à l'activation de la voie mTORC1 (PubMed:12150915, PubMed:12172553). Références associées : PMID:12150915, PMID:12172553
• L'AKT1 phosphoryle les facteurs de transcription FOXO, y compris FOXO1 sur la Thr-24, la Ser-256 et la Ser-319, induisant la liaison aux protéines 14-3-3 et la rétention cytoplasmique, inhibant ainsi leurs fonctions pro-apoptotiques (PubMed:10358075). Références associées : PMID:10358075
• La protéine se localise dans le cytoplasme, le noyau, la membrane cellulaire et l'espace intermembranaire mitochondrial, reflétant ses rôles réglementaires multifacettes.
• L'AKT1 est exprimée dans tous les types de cellules humaines, avec une expression accrue observée dans le cancer de la prostate et une phosphorylation élevée de la Tyr-176 dans les stades progressifs du cancer du sein.
• La phosphorylation sur la Thr308 est un événement critique pour l'activation de la kinase AKT1, et elle sert de marqueur clé de l'activité de la voie PI3K dans les applications de recherche et de diagnostic.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un phosphopeptide synthétique correspondant aux résidus autour de la Thr308 de l'AKT1 humaine ; validez la spécificité en comparant les signaux avec et sans traitement à la phosphatase.
• Pour le Western blot, une bande majeure est attendue à environ 56 kDa ; utilisez des inhibiteurs de protéases et de phosphatases frais lors de la préparation des échantillons pour préserver la phosphorylation.
• Envisagez d'utiliser l'anticorps en ELISA pour quantifier les niveaux de phosphorylation de l'AKT1 sur la Thr308 ; le couplage avec un anticorps anti-AKT1 total permet la normalisation.
• Optimisez la dilution de l'anticorps pour chaque application et chaque lignée cellulaire afin d'obtenir le meilleur rapport signal/bruit.

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