Anticorps polyclonal de lapin anti-AKAP8 pour WB, IF/ICC, ELISA - O43823

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'AKAP8

• L'AKAP8, également connue sous le nom d'AKAP95, est une protéine d'ancrage de la kinase A qui compartimente la protéine kinase dépendante de l'AMPc (PKA de type II) vers des sites subcellulaires spécifiques, facilitant ainsi une signalisation précise (PubMed:9473338). Références associées : PMID:9473338
• Elle agit comme une échafaudage pour la PKA sur les chromosomes mitotiques, recrutant la sous-unité NCAPD2 du complexe condensine pour maintenir la condensation des chromosomes lors de la mitose, indépendamment de l'ancrage de la PKA (PubMed:10601332, PubMed:10791967, PubMed:11964380). Références associées : PMID:10601332, PMID:10791967, PMID:11964380
• L'AKAP8 est impliquée dans la régulation du cycle cellulaire en facilitant la livraison des cyclines D/E au CDK4 et est nécessaire pour la transition G2/M et la désacétylation des histones mitotiques via le recrutement de HDAC3 (PubMed:14641107, PubMed:16980585). Références associées : PMID:14641107, PMID:16980585
• Elle module la signalisation des récepteurs Toll-like, supprimant la production de TNF lors de l'activation précoce des macrophages induite par le LPS via le ciblage de la PKA vers NFKB1 (Par similitude).
• La protéine se localise dans plusieurs compartiments cellulaires, notamment le noyau, le nucléole, la matrice nucléaire et le cytoplasme, permettant des fonctions dépendantes du contexte telles que le remodelage de la chromatine, la régulation transcriptionnelle et la transduction du signal.
• L'AKAP8 se lie préférentiellement à l'ADN riche en GC et s'associe à la chromatine de l'ARN ribosomique (ARNr), suggérant un rôle dans la régulation de la transcription de l'ADNr (PubMed:26683827). Références associées : PMID:26683827
• Fortement exprimée dans le cœur, le foie, le muscle squelettique, le rein, le pancréas et les cellules dendritiques matures, ce qui reflète sa grande pertinence physiologique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 480–692 de l'AKAP8 humaine, une région qui comprend les domaines de doigt de zinc C-terminaux ; tenez compte du fait que l'anticorps peut reconnaître des épitopes au sein de cette région de liaison à l'ADN fonctionnellement pertinente.
• Pour le Western blot (WB), une bande spécifique à environ 76 kDa est attendue ; utilisez des lysats enrichis en noyaux de cellules humaines ou murines (par exemple, HeLa, HEK293, NIH/3T3) comme témoins positifs et validez avec des marqueurs de poids moléculaire.
• En immunofluorescence (IF/ICC), anticipez une coloration nucléaire ponctuée avec une localisation nucléolaire et cytoplasmique possible ; une co-coloration avec des marqueurs nucléaires (par exemple, DAPI, lamine) est recommandée pour confirmation.
• Pour l'ELISA, des protocoles directs ou en sandwich standard peuvent être appliqués ; optimisez la concentration de l'antigène de revêtement et la dilution de l'anticorps en utilisant la protéine AKAP8 recombinante ou un peptide.
• Compte tenu de la réactivité croisée avec la souris, cet anticorps convient aux études interspécifiques ; confirmez toujours la spécificité par des contrôles de knockdown ou de knockout pour garantir des données fiables.

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