Anticorps polyclonal anti-AK4 de lapin pour WB, IP, ELISA - P27144

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'AK4

• L'AK4, également appelé adénylate kinase 3-like ou GTP:AMP phosphotransférase, est une enzyme mitochondriale codée par le gène AK4 (GeneID: 205) appartenant à la famille des adénylate kinases.
• Il fonctionne comme une nucléoside phosphate kinase mitochondriale à large spécificité, maintenant l'homéostasie nucléotidique cellulaire en catalysant les interconversions des nucléosides phosphates. Références associées : PMID:19073142 PMID:19766732 PMID:23416111
• L'AK4 phosphoryle préférentiellement l'AMP en ADP en utilisant l'ATP comme donneur de phosphate ; il peut également utiliser le GTP comme donneur de phosphate alternatif pour la phosphorylation de l'AMP. Références associées : PMID:19766732
• In vitro, l'AK4 présente une spécificité de substrat plus large, phosphorylant le CMP, le dAMP et le dCMP, et utilise le GTP comme donneur alternatif. Références associées : PMID:19766732 PMID:23416111
• L'enzyme possède également une activité diphosphate kinase, générant de l'ATP, du CTP, du GTP, de l'UTP, du TTP, du dATP, du dCTP et du dGTP à partir de leurs diphosphates correspondants. Références associées : PMID:23416111
• L'AK4 joue un rôle essentiel dans la régulation des niveaux cellulaires d'ATP en modulant la phosphorylation et l'activation du capteur d'énergie AMPK. Références associées : PMID:24767988 PMID:26980435
• Il exerce une fonction protectrice dans la réponse cellulaire au stress oxydatif, contribuant à la résilience mitochondriale. Références associées : PMID:19130895 PMID:23474458 PMID:26980435
• Au niveau sous-cellulaire, l'AK4 est localisé dans la matrice mitochondriale, ce qui est cohérent avec son rôle dans le métabolisme nucléotidique mitochondrial.
• L'expression tissulaire est la plus élevée dans le rein, modérée dans le cœur et le foie, et faible dans le cerveau, ce qui reflète son importance dans les tissus à haute demande énergétique.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond aux 223 acides aminés N-terminaux de l'AK4 humain, couvrant le domaine conservé de l'adénylate kinase. Cette région est très homologe entre l'humain et la souris, ce qui confirme la réactivité croisée observée.
• Pour l'analyse par Western blot (WB), utilisez des lysats tissulaires de rein ou de foie comme contrôles positifs. Envisagez une dilution initiale de 1:500 à 1:2000 et validez avec des marqueurs de poids moléculaire appropriés (~25 kDa).
• L'immunoprécipitation (IP) peut gagner à utiliser des fractions enrichies en mitochondries pour augmenter l'abondance de la cible. Optimisez la quantité d'anticorps et les conditions d'incubation de manière empirique.
• Pour les applications ELISA, revêtez la plaque avec la protéine AK4 recombinante comme étalon et titrez l'anticorps. L'association avec un anticorps de détection nécessite une validation rigoureuse.
• L'AK4 étant une protéine de la matrice mitochondriale, envisagez une fractionnement sous-cellulaire ou des colorations spécifiques d'organites pour améliorer la spécificité du signal.

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