Anticorps polyclonal de lapin anti-Agrine pour WB, IF/ICC, ELISA - O00468

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Agrine

• L'Agrine est un grand protéoglycane à sulfate d'héparane qui existe sous de multiples isoformes générées par épissage alternatif, avec des formes sécrétées et transmembranaires jouant des rôles distincts dans la formation de la jonction neuromusculaire (JNM), la différenciation synaptique et la croissance des neurites.
• Au niveau de la JNM, l'agrine est un organisateur clé : elle se lie à LRP4 pour activer le récepteur MUSK, déclenchant la différenciation postsynaptique et l'agrégation des récepteurs de l'acétylcholine (AChR), un processus essentiel à la fonction synaptique. Références associées : PMID:21969364
• L'Agrine régule positivement la formation du cartilage en se liant à l'α-dystroglycane et en régulant à la hausse le facteur de transcription SOX9, un régulateur essentiel de la différenciation des chondrocytes. Références associées : PMID:26290588
• Les isoformes z+ neuronales contiennent de courtes insertions C-terminales (8 à 19 acides aminés) et sont des activateurs puissants de l'agrégation des AChR ; les facteurs d'épissage NOVA1 et NOVA2 contrôlent l'inclusion de ces insertions.
• La protéine est localisée dans la matrice extracellulaire, la membrane basale et la fente synaptique, et une fraction est ancrée à la membrane en tant que protéine transmembranaire ; elle est exprimée dans le poumon, le rein, le muscle, les neurones et le cartilage articulaire.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent une glycosylation extensive, l'attachement de chaînes de glycosaminoglycanes sulfate d'héparane et sulfate de chondroïtine, ainsi que la phosphorylation, qui modulent sa signalisation et sa stabilité.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Étant donné que l'immunogène correspond à la région N-terminale (acides aminés 30–350) commune à plusieurs isoformes, cet anticorps polyclonal peut détecter différents variants d'épissage de l'agrine. Envisagez de confirmer la spécificité de l'isoforme à l'aide de contrôles spécifiques d'isoforme ou d'une analyse de séquence.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit de l'agrine pleine longueur est d'environ 217 kDa ; cependant, le clivage protéolytique produit des fragments plus petits (par exemple, 22 kDa C-terminal, 110 kDa N-terminal). Tenez-en compte lors de l'interprétation des profils de bandes.
• En IF/ICC, l'agrine se localise à la surface cellulaire, dans la matrice extracellulaire et au niveau des synapses ; envisagez d'utiliser des conditions de perméabilisation optimisées pour les protéines associées à la membrane et d'inclure des contrôles appropriés.
• Cet anticorps est adapté aux applications ELISA ; validez la linéarité et la sensibilité avec de l'agrine recombinante ou des lysats tissulaires pertinents.

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