Anticorps Monoclonal Lapin Anti-AGL (GDE) pour WB, IF/ICC, ELISA - P35573

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'AGL

• L'AGL, également connue sous le nom d'enzyme de débranchement du glycogène (GDE), est codée par le gène AGL et appartient à la famille des glycoside hydrolases, combinant des activités de glycosidase et de glycosyltransférase.
• Elle fonctionne comme une enzyme multifonctionnelle dans la dégradation du glycogène, possédant à la fois des domaines 4-alpha-glucanotransférase et amylo-1,6-glucosidase qui agissent séquentiellement.
• L'enzyme est essentielle à la dégradation complète du glycogène, transférant une courte chaîne d'oligosaccharides puis clivant le glucose alpha-1,6 restant aux points de branchement.
• L'AGL se localise dans le cytoplasme, ce qui est cohérent avec son rôle dans le métabolisme cytosolique du glycogène et son interaction avec les particules de glycogène.
• Plusieurs isoformes sont produites par épissage alternatif, avec une expression spécifique aux tissus : l'isoforme 1 prédomine dans le foie, le rein et les cellules lymphoblastoïdes ; les isoformes 2, 3 et 4 sont supplémentaires dans le muscle et le cœur ; les isoformes 5 et 6 se trouvent à la fois dans le foie et le muscle.
• Les mutations du gène AGL causent la maladie de stockage du glycogène de type III (maladie de Cori), soulignant son rôle critique dans l'homéostasie du glycogène.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation et l'ubiquitination, comme le montrent les études protéomiques, ce qui pourrait réguler l'activité ou la stabilité de l'enzyme.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 1-100 de l'AGL humaine (P35573). Cette région N-terminale peut présenter une forte conservation entre l'humain, la souris et le rat, ce qui est cohérent avec la réactivité croisée rapportée.
• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit est d'environ 175 kDa ; cependant, l'épissage alternatif peut générer des bandes supplémentaires correspondant aux isoformes spécifiques aux tissus.
• Lors de la réalisation d'une immunofluorescence (IF/ICC), un marquage cytoplasmique est attendu, et des méthodes appropriées de perméabilisation et de fixation doivent être optimisées.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour des configurations directes ou de capture/détection ; des expériences de dilution en série sont recommandées pour déterminer les concentrations de travail optimales.
• Envisagez de valider les performances de l'anticorps dans votre système d'échantillonnage spécifique, car les niveaux d'expression et la prévalence des isoformes peuvent varier entre les types de cellules et les tissus.

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