Anticorps polyclonal de lapin anti-AGK pour WB, ELISA - Q53H12

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'AGK

• L'AGK est une kinase lipidique mitochondriale qui phosphoryle le monoacylglycérol et le diacylglycérol pour produire respectivement l'acide lysophosphatidique (LPA) et l'acide phosphatidique (PA). Références associées : PMID:15939762
• La surexpression de l'AGK augmente la formation et la sécrétion de LPA, entraînant une transactivation de l'EGFR et l'activation de la voie MAPK, favorisant ainsi la croissance cellulaire. Références associées : PMID:15939762
• L'AGK présente également une activité de kinase de céramide et phosphoryle préférentiellement le 1,2-dioleoylglycérol par rapport au 2,3-dioleoylglycérol (Par similitude).
• Indépendamment de sa fonction de kinase, l'AGK est un composant du complexe TIM22 dans la membrane interne mitochondriale. Références associées : PMID:28712724 PMID:28712726
• Le complexe TIM22 médie l'import et l'insertion de protéines transmembranaires à plusieurs passages, telles que les transporteurs de métabolites (ex: ANT1/SLC25A4), dans la membrane interne, en utilisant le potentiel de membrane comme force motrice. Références associées : PMID:28712724
• Localisation subcellulaire : membrane interne mitochondriale et espace intermembranaire.
• Forte expression dans le muscle, le cœur, le rein et le cerveau.
• Les mutations de l'AGK sont associées à des maladies incluant la cataracte, la cardiomyopathie et les troubles mitochondriaux primaires (syndrome de Sengers).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre la région C-terminale (aa 233–422) de l'AGK humaine, qui comprend une partie du domaine kinase. Confirmez que l'anticorps reconnaît l'AGK endogène de pleine longueur dans votre système.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est de 47 kDa ; validez la taille de la bande dans des conditions réductrices sur des lysats de tissus ou de cellules pertinents.
• L'AGK étant une protéine de la membrane interne mitochondriale, assurez-vous d'une lyse efficace des membranes mitochondriales (par exemple, en utilisant un tampon RIPA avec sonication) pour l'extraction des protéines.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec le rat, permettant son utilisation potentielle dans des modèles murins ; incluez des témoins positifs et négatifs appropriés.
• Pour l'ELISA, optimisez la concentration de l'antigène de revêtement et la dilution de l'anticorps primaire en utilisant l'AGK recombinante ou des extraits cellulaires ; envisagez de coupler avec un anticorps de détection provenant d'une espèce hôte différente.

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