Anticorps polyclonal anti-ADAMTS5 pour WB, ELISA - Q9UNA0

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ADAMTS5

• L'ADAMTS5, également connue sous le nom d'aggrécanase-2, ADAM-TS 11 ou ADMP-2, est une métalloprotéinase sécrétée appartenant à la famille des protéases extracellulaires ADAMTS.
• L'ADAMTS5 fonctionne comme une enzyme de dégradation de la matrice extracellulaire (ECM) qui présente une activité protéolytique envers les protéoglycanes de chondroïtine sulfate hyalectane (CSPG), y compris l'ACAN, le VCAN, le BCAN et le NCAN, jouant un rôle clé dans le renouvellement du cartilage et le remodelage des tissus conjonctifs. Références associées : PMID:16133547 PMID:18992360
• La protéine se localise dans l'espace extracellulaire et la matrice extracellulaire, où elle remodèle les environnements péricellulaires pendant le développement et le maintien des tissus.
• L'ADAMTS5 contient des domaines métalloprotéase, désintégrine et des répétitions de type thrombospondine-1 ; l'activité catalytique nécessite la liaison du zinc, et l'enzyme est initialement produite sous forme de zymogène.
• L'expression tissulaire est détectée à de faibles niveaux dans le placenta, le cœur, le cerveau, le col de l'utérus, l'utérus, la vessie, l'œsophage et le cartilage, avec une abondance accrue dans les capsules articulaires arthritiques.
• Par le clivage du versican, l'ADAMTS5 contribue à la morphogenèse des membres et du cœur embryonnaires et facilite la fusion des myoblastes lors du développement et de la régénération du muscle squelettique.
• L'ADAMTS5 participe également à la migration des lymphocytes T à partir des ganglions lymphatiques drainants suite à une infection virale.
• La protéine est soumise à un clivage sur des paires de résidus basiques et contient de multiples ponts disulfures et sites de glycosylation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à un peptide synthétique situé entre les acides aminés 601–700 de l'ADAMTS5 humain (NP_008969.2). Lors de la conception des stratégies de détection, vérifiez que la séquence ciblée est conservée chez l'espèce qui vous intéresse, car une réactivité croisée est rapportée pour l'humain, la souris et le rat.
• Pour le Western blotting, le poids moléculaire prédit est d'environ 101 kDa. Optimisez le pourcentage de gel (par exemple, 8–10 % de polyacrylamide) et les conditions de transfert pour assurer un transfert efficace de cette protéine relativement volumineuse. Incluez un lysat témoin positif provenant de tissu placentaire ou cartilagineux.
• Comme il s'agit d'un anticorps polyclonal, il peut reconnaître plusieurs épitopes ; confirmez la spécificité par une détection parallèle avec une méthode indépendante (par exemple, extinction par siRNA ou compétition antigénique) si nécessaire.
• Pour l'ELISA, associez-le à un anticorps de détection approprié et envisagez d'utiliser de l'ADAMTS5 recombinant ou des extraits tissulaires comme antigène de capture. Titrez l'anticorps pour déterminer une concentration de travail optimale.
• Bien que l'anticorps soit validé pour le WB et l'ELISA par le fabricant, les performances dans d'autres applications (par exemple, IHC, IF) doivent être testées empiriquement dans les conditions de tampon et d'échantillon appropriées.

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