Anticorps polyclonal de lapin anti-ADAM8 pour WB et ELISA - P78325

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ADAM8

• L'ADAM8 (Protéine contenant un domaine désintégrine et métalloprotéase 8), également désigné CD156a ou MS2, est une glycoprotéine transmembranaire appartenant à la famille des métalloprotéases ADAM.
• La protéine subit un épissage alternatif, générant plusieurs isoformes pouvant présenter des propriétés fonctionnelles distinctes.
• L'ADAM8 se caractérise par son architecture de domaine, incluant un pro-domaine, un domaine métalloprotéase, un domaine désintégrine et une répétition de type EGF, avec un site catalytique de liaison au zinc critique pour son activité hydrolase.
• Fonctionnellement, l'ADAM8 peut participer au clivage (shedding) des molécules de surface cellulaire et est impliqué dans l'extravasation des leucocytes lors des réponses inflammatoires.
• L'analyse de la localisation subcellulaire place l'ADAM8 au niveau de la membrane plasmique en tant que protéine transmembranaire de type I à passage unique, avec son domaine protéase exposé à l'extérieur de la cellule.
• L'expression de l'ADAM8 est principalement observée sur les cellules immunitaires, spécifiquement les neutrophiles et les monocytes, ce qui est cohérent avec son rôle dans l'inflammation.
• La protéine est sujette à des modifications post-traductionnelles, notamment la glycosylation et la formation de ponts disulfures, qui peuvent influencer sa stabilité et sa fonction.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé pour générer cet anticorps polyclonal de lapin englobe les acides aminés 17 à 300 de l'ADAM8 humain, couvrant le pro-domaine et le domaine métalloprotéase ; cette région peut aider à cibler des épitopes fonctionnellement pertinents.
• Pour l'analyse par Western blot, une bande autour de 89 kDa est attendue sur la base du poids de la protéine ; validez la bande détectée avec des témoins positifs et négatifs appropriés ou un knockdown par ARNsi si nécessaire.
• Lors de la réalisation d'un ELISA, envisagez d'optimiser la concentration de revêtement de l'anticorps et de l'associer à un anticorps de détection approprié ; la réactivité croisée avec l'ADAM8 de souris et de rat permet des études multi-espèces.
• Cet anticorps est censé reconnaître les formes natives et dénaturées de l'ADAM8, mais un test empirique dans des conditions réductrices ou non réductrices est recommandé pour votre configuration expérimentale spécifique.
• Compte tenu de la nature métalloprotéase de l'ADAM8, assurez-vous que les tampons de préparation des échantillons sont compatibles avec la préservation de l'activité dépendante du zinc si des tests fonctionnels en aval sont prévus.

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