Anticorps polyclonal de lapin anti-ADAM28 pour WB, ELISA - Q9UKQ2

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation d'ADAM28

• ADAM28 (protéine 28 contenant un domaine désintégrine et métalloprotéinase) appartient à la famille ADAM, également connue sous le nom d'eMDC II (protéine II de type métalloprotéinase épididymaire, de type désintégrine et riche en cystéines) ou MDC-L. Elle est codée par le gène ADAM28 (alias ADAM23, MDCL) et subit un épissage alternatif.
• Elle agit comme une métalloprotéase impliquée dans les événements d'adhésion et de protéolyse au cours de l'émigration des lymphocytes. Elle pourrait intervenir dans le clivage ectodomainal de protéines de surface des lymphocytes telles que FASL et CD40L, modulant ainsi les réponses immunitaires.
• ADAM28 pourrait également jouer un rôle dans la maturation des spermatozoïdes, compte tenu de son expression et de son contexte fonctionnel.
• La localisation subcellulaire comprend la membrane cellulaire et la sécrétion, ce qui est cohérent avec ses domaines transmembranaire et sécrété. La protéine contient un peptide signal, un propeptide, des domaines métalloprotéase, désintégrine, riche en cystéines, de type EGF et transmembranaire.
• Les principales modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation, la formation de ponts disulfure et le clivage au niveau d'une paire de résidus basiques pour convertir le zymogène en protéase active. Elle lie le zinc en tant que cofacteur de métalloprotéase.
• ADAM28 est principalement exprimée dans les tissus lymphoïdes secondaires : ganglions lymphatiques, rate, intestin grêle, estomac, côlon, appendice et trachée, la population lymphocytaire constituant la source principale. L'isoforme 2 présente une expression préférentielle dans la rate.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 199-440 d'ADAM28 humain, qui se situent dans la région extracellulaire contenant les domaines protéase, désintégrine et riche en cystéines. Cette conception pourrait permettre de reconnaître à la fois les formes membranaires et sécrétées de la protéine.
• Pour le Western blot, envisagez d'utiliser des lysats de tissus lymphoïdes humains (par exemple, ganglion lymphatique, rate) ou de lymphocytes cultivés, car il s'agit de sites d'expression connus. La réactivité croisée avec la souris doit être validée à l'aide de contrôles appropriés provenant de tissus ou de lignées cellulaires.
• La préparation des échantillons pour la SDS-PAGE peut nécessiter des conditions réductrices afin de dissocier les structures liées par des ponts disulfure ; le poids moléculaire prédit de la protéine pleine longueur est d'environ 87 kDa, bien que des fragments puissent être observés en raison du traitement du zymogène.
• Pour les applications ELISA, évaluez la détection d'ADAM28 soluble dans les fluides biologiques ou les surnageants cellulaires, car la protéine peut être sécrétée. Incluez une protéine recombinante ou des contrôles positifs connus pour optimiser le dosage.

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