Anticorps Polyclonal Anti-ADAM10 pour WB, IF/ICC, FC, ELISA - O14672

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'ADAM10

• L'ADAM10, également connu sous le nom de Kuzbanian ou CDw156, est un membre de la famille des ADAM (a disintegrin and metalloprotease) et fonctionne comme une métalloprotéase transmembranaire impliquée dans le clivage ectodomainique de divers substrats.
• Il clive le précurseur lié à la membrane du facteur de nécrose tumorale alpha (TNF-alpha) pour libérer le TNF soluble, une étape critique dans la signalisation inflammatoire. Références connexes : PMID:20592283
• L'ADAM10 agit comme l'alpha-sécrétase pour la protéine précurseur de l'amyloïde (APP), réduisant la production de bêta-amyloïde et la liant à la pathologie de la maladie d'Alzheimer. Références connexes : PMID:11786905, PMID:26686862, PMID:29224781
• Il clive également d'autres molécules d'adhésion et récepteurs tels que CD44, les cadhérines, les éphrines et les ligands Notch, régulant ainsi l'adhésion cellulaire, la migration et les voies de signalisation du développement.
• Au niveau subcellulaire, l'ADAM10 se localise à la membrane plasmique, à l'appareil de Golgi, aux vésicules recouvertes de clathrine et aux jonctions cellulaires (jonctions adhérentes), ainsi qu'aux projections neuronales comme les axones et les dendrites.
• La protéine subit un traitement post-traductionnel complexe, notamment la glycosylation, la formation de ponts disulfures et le clivage de son pro-domaine pour générer la protéase active.
• L'ADAM10 est largement exprimée, avec des niveaux élevés dans le cerveau, les tissus lymphoïdes (rate, ganglion lymphatique, thymus), la moelle osseuse et le cartilage, ce qui est cohérent avec ses rôles dans la neurogenèse et la fonction immunitaire. Références connexes : PMID:23676497, PMID:11511685, PMID:9016778

Conseils Expérimentaux et Techniques

• L'immunogène est une protéine recombinante couvrant les acides aminés 214 à 672 de l'ADAM10 humaine, englobant des domaines extracellulaires clés ; l'anticorps peut reconnaître à la fois la forme pleine longueur et les formes clivées.
• En Western blot, attendez-vous à une bande majeure près de 84 kDa pour la protéine pleine longueur ; des bandes supplémentaires peuvent apparaître en raison du clivage ou de l'activation. Optimisez les contrôles de chargement et validez avec vos lysats d'échantillons spécifiques.
• Pour l'immunofluorescence/ICC, testez les conditions perméabilisées et non perméabilisées pour comparer les motifs de coloration de surface et intracellulaires.
• En cytométrie en flux, titrez l'anticorps avec soin et utilisez des contrôles d'isotype pour tenir compte du bruit de fond, en particulier lors de l'analyse de cellules avec une expression variable d'ADAM10.
• Lors de la réalisation d'un ELISA, envisagez de coupler avec un anticorps de capture spécifique d'un épitope différent ou d'utiliser de l'ADAM10 recombinant comme standard pour assurer la quantification.
• Comme il est signalé que cet anticorps présente une réactivité croisée avec l'ADAM10 de rat, vérifiez la réactivité dans vos échantillons dérivés du rat ; pour d'autres espèces, consultez l'homologie de séquence et effectuez des tests pilotes.

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