Anticorps polyclonal de lapin anti-ACTN1 pour WB, IHC-P, ELISA - P12814

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ACTN1

• L'ACTN1 code pour l'alpha-actinine-1, une isoforme cytosquelettique non musculaire de 103 kDa appartenant à la famille des spectrines, caractérisée par des domaines de liaison à l'actine N-terminaux et des motifs "main EF" de liaison au calcium C-terminaux.
• Elle fonctionne comme une protéine de réticulation de l'actine F, regroupant les filaments d'actine et les ancrant à diverses structures intracellulaires, maintenant ainsi l'intégrité du cytosquelette et la forme cellulaire.
• L'alpha-actinine-1 participe à la formation de la synapse immunitaire : son association avec IGSF8 à l'interface lymphocyte T/cellule présentatrice d'antigène est nécessaire pour une activation efficace des lymphocytes T. Références associées : PMID:22689882
• La protéine se localise sur divers sites subcellulaires, notamment les lignes Z des sarcomères, les plaques d'adhésion, les adhésions focales et les structures dynamiques telles que les replis membranaires et les jonctions cellulaires.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation et la phosphorylation, qui peuvent réguler son affinité de liaison à l'actine et son ciblage subcellulaire.
• L'épissage alternatif génère de multiples isoformes avec des distributions tissulaires et des spécialisations fonctionnelles distinctes.
• Les mutations de l'ACTN1 sont associées à des troubles plaquettaires héréditaires (par exemple, BDPLT15), soulignant son rôle critique dans l'organisation du cytosquelette des mégacaryocytes et des plaquettes.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène comprend une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 1–330, englobant le domaine de liaison à l'actine N-terminal ; l'anticorps devrait reconnaître l'ACTN1 totale, indépendamment de l'isoforme.
• Recommandé pour la détection par western blot (WB) de la bande d'environ 103 kDa dans les lysats cellulaires ou tissulaires humains et murins ; envisagez d'utiliser un fractionnement nucléaire/cytoplasmique pour enrichir les signaux.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), les conditions de récupération de l'antigène doivent être optimisées ; un marquage positif dans les muscles, les plaquettes et les cellules en culture peut servir de contrôle.
• En ELISA, l'anticorps peut fonctionner comme réactif de capture ou de détection ; l'appariement avec un autre clone peut améliorer la sensibilité dans les formats sandwich.
• La réactivité croisée avec l'humain et la souris est confirmée ; pour d'autres espèces, validez par alignement de séquence de la région de l'immunogène.

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