Anticorps monoclonal anti-Caspase-3 active pour WB, ELISA - P42574

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Caspase-3

• La Caspase-3 est une thiol protéase qui agit comme une caspase effectrice majeure lors de la phase d'exécution de l'apoptose, catalysant le clivage de nombreuses protéines. Références associées : PMID:18723680, PMID:20566630, PMID:23650375
• Au début de l'apoptose, elle clive la poly(ADP-ribose) polymérase PARP1 au niveau d'une liaison aspartate-glycine spécifique. Références associées : PMID:10497198, PMID:16374543, PMID:7596430
• La Caspase-3 active des caspases en aval telles que les caspase-6, -7 et -9, amplifiant le signal apoptotique. Références associées : PMID:7596430
• Elle clive la huntingtine et est impliquée dans la pathologie de la maladie de Huntington. Références associées : PMID:8696339
• Outre l'apoptose, la caspase-3 médie la pyroptose en clivant la gasdermine-E (GSDME). Références associées : PMID:35338844, PMID:35446120
• La Caspase-3 est fortement exprimée dans les cellules immunitaires et des tissus comme le poumon, la rate et le cœur, et est majoritairement cytoplasmique.
• La protéine existe sous forme de zymogène et est activée par clivage protéolytique ; elle est également régulée par acétylation, phosphorylation, S-nitrosylation et ubiquitination.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 1–100 de CASP3 (P42574). Cette région comprend le prodomaine N-terminal : il faut considérer que l'anticorps peut reconnaître à la fois la forme pro et la forme clivée selon l'accessibilité de l'épitope. Vérifiez la spécificité pour la Caspase-3 active dans votre système biologique d'étude.
• Pour le Western blot (WB), la Caspase-3 active peut apparaître sous forme de fragments clivés (par exemple p19, p17) plutôt que sous la forme pro entière de 32 kDa. Utilisez des inducteurs d'apoptose appropriés et des contrôles positifs (par exemple des cellules traitées à la staurosporine) pour confirmer la détection de la forme active.
• Compte tenu de sa localisation cytoplasmique, préparez des extraits cytosoliques pour une détection optimale en WB ou ELISA.
• L'anticorps est validé pour WB et ELISA sur échantillons humains. Pour d'autres applications ou espèces, la réactivité croisée doit être vérifiée expérimentalement.

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