Anticorps polyclonal Anti-ACLY pour WB, IHC-P, IF, ELISA - P53396

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ACLY

• Le gène ACLY code l'ATP-citrate synthase, également connue sous le nom d'ATP-citrate (pro-S-)-lyase (ACL) ou de enzyme de clivage du citrate. C'est une enzyme lipogénique clé qui catalyse le clivage du citrate en oxaloacétate et en acétyl-CoA, fournissant un substrat critique pour la biosynthèse des lipides de novo.
• L'enzyme agit comme un pont entre le métabolisme des glucides et la synthèse des acides gras, générant de l'acétyl-CoA cytosolique, qui est essentiel pour la production de cholestérol et d'acides gras.
• L'ACLY est principalement localisée dans le cytoplasme et le cytosol, où elle accède au citrate exporté des mitochondries.
• Les modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation et la phosphorylation, régulent l'activité de l'ACLY en réponse aux signaux nutritionnels et hormonaux.
• L'épissage alternatif produit plusieurs variantes de transcription, permettant potentiellement un réglage fin de la fonction enzymatique dans différents tissus.
• L'ACLY appartient à la famille des acyl-CoA synthétases (forme AMP)/ligases d'acide AMP et nécessite de l'ATP et du magnésium comme cofacteurs pour son activité de transférase.
• En raison de son rôle central dans la biosynthèse des lipides, l'ACLY est une cible d'intérêt dans les troubles métaboliques, la recherche cardiovasculaire et les études sur le métabolisme du cancer.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre la région C-terminale (acides aminés 752–1101) de l'ACLY humaine, ce qui peut améliorer la spécificité pour la protéine cible.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 121 kDa ; envisagez d'utiliser un gel SDS-PAGE à 6–8 % et des conditions de transfert appropriées (par exemple, transfert humide à 100 V pendant 60 à 90 minutes) pour résoudre cette protéine de poids moléculaire élevé.
• En IHC-P, les méthodes standard de récupération de l'antigène (par exemple, tampon citrate pH 6,0) peuvent être bénéfiques ; des expériences pilotes sont recommandées pour optimiser le rapport signal/bruit.
• Pour IF/ICC, les conditions de fixation et de perméabilisation doivent être déterminées empiriquement ; la fixation au méthanol ou le traitement au Triton X-100 à 0,1 % sont des points de départ courants pour les cibles cytosoliques.
• Pour vérifier la spécificité de l'anticorps, envisagez d'utiliser des modèles cellulaires avec knockdown ou knockout d'ACLY, ou de comparer avec des contrôles tissulaires positifs/négatifs connus.

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