Anticorps monoclonal anti-Acétyl-CoA Carboxylase pour WB, IP, ELISA - Q13085 / O00763

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Acétyl-CoA Carboxylase 1

• L'acétyl-CoA carboxylase 1 (ACC1) est une enzyme cytosolique dépendante de la biotine qui catalyse la carboxylation dépendante de l'ATP de l'acétyl-CoA en malonyl-CoA, la première étape limitante de la biosynthèse de novo des acides gras. Références associées : PMID:20457939, PMID:20952656, PMID:29899443
• La réaction se déroule en deux étapes : la carboxylation dépendante de l'ATP du groupe prosthétique biotine sur le domaine porteur de biotine carboxylase (BCC), suivie du transfert du groupe carboxyle à l'acétyl-CoA.
• ACC1 est une enzyme multifonctionnelle avec des domaines biotine carboxylase (BC), protéine porteuse de biotine carboxylase (BCCP) et carboxyltransférase (CT), permettant son activité catalytique complexe.
• La localisation subcellulaire est principalement cytoplasmique et cytosolique, ce qui correspond à son rôle dans la synthèse cytosolique des acides gras.
• Expression tissulaire : ACC1 est exprimée dans le cerveau, le placenta, le muscle squelettique, les tissus rénaux, pancréatiques et adipeux ; son expression est faible dans le tissu pulmonaire et n'est pas détectée dans le foie.
• L'enzyme est étroitement régulée par phosphorylation (par ex., par l'AMPK), par des effecteurs allostériques (activation par le citrate, inhibition par le palmitoyl-CoA) et par l'utilisation de promoteurs alternatifs, soulignant son rôle central dans le contrôle métabolique.
• ACC2 (codée par ACACB) est un isoforme mitochondrial qui génère du malonyl-CoA pour inhiber la carnitine palmitoyltransférase I, régulant ainsi l'oxydation des acides gras ; l'anticorps peut reconnaître à la fois ACC1 et ACC2 en raison de l'homologie des séquences.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 500–600 de l'ACC1 humaine (NP_942133.1), une région probablement partagée avec ACC2 ; envisagez de valider la spécificité de l'isoforme dans votre système d'échantillonnage.
• Pour le WB, en raison du poids moléculaire élevé d'ACC1 (265 kDa) et d'ACC2 (276 kDa), utilisez des gels SDS-PAGE à faible pourcentage (ex. 6–8 %) et des temps de transfert prolongés ; incluez des marqueurs de haut poids moléculaire pré-colorés.
• Vérifiez les performances de l'anticorps dans votre espèce et votre application ; bien qu'il soit validé pour l'humain, la souris et le rat, la réactivité croisée dans d'autres espèces ou formats de test doit être confirmée empiriquement.
• Pour l'IP, optimisez la concentration d'anticorps et utilisez des systèmes de billes appropriés (ex. protéine A/G) ; tenez compte de l'impact de la biotinylation ou de la biotine endogène sur la détection.
• En ELISA, associez cet anticorps à un réactif de détection ACC approprié ; testez la spécificité avec des contrôles de protéine ACC1 ou ACC2 recombinante.

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