Anticorps polyclonal de lapin anti-ACADM (MCAD) pour WB, IF/ICC, ELISA - P11310

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l’ACADM

• La déshydrogénase des acyl-CoA à chaîne moyenne (MCAD, codée par ACADM) est une enzyme de la matrice mitochondriale qui catalyse la première étape limitante de la β-oxydation des acides gras : la déshydrogénation dépendante du FAD des thioesters d’acyl-CoA d’acides gras en trans-2-énoyl-CoA, avec transfert des électrons vers la flavoprotéine de transfert d’électrons (ETF). L’ETF transfère ensuite les électrons à la chaîne respiratoire mitochondriale. Références associées : PMID:1970566, PMID:21237683, PMID:2251268, PMID:15159392, PMID:25416781

• La MCAD présente une préférence de substrat pour les acyl-CoA d’acides gras saturés à chaîne moyenne (C6–C12), mais peut également agir sur des chaînes plus longues (C14, C16). Références associées : PMID:1970566, PMID:21237683, PMID:2251268

• Localisée dans la matrice mitochondriale, l’ACADM est exprimée de manière ubiquitaire, avec des niveaux d’expression particulièrement élevés dans le cœur, le foie et les muscles squelettiques.

• Les mutations de l’ACADM sont responsables du déficit en déshydrogénase des acyl-CoA à chaîne moyenne (MCADD), une erreur innée fréquente du métabolisme des acides gras.

• La protéine contient un cofacteur FAD et subit des modifications post-traductionnelles, notamment l’acétylation et la phosphorylation ; l’épissage alternatif produit plusieurs isoformes.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène était une protéine recombinante couvrant les résidus 1 à 220 de l’ACADM humain, ce qui suggère que l’anticorps peut reconnaître plusieurs épitopes N-terminaux. Pour le western blot, prévoir une bande d’environ 47 kDa ; valider la détection à l’aide d’échantillons riches en mitochondries, tels que des lysats de foie ou de muscle.

• Cet anticorps a été testé en WB, IF/ICC et ELISA. Pour l’IF/ICC, les profils de marquage mitochondrial doivent être confirmés à l’aide de marqueurs d’organites. Optimiser empiriquement les dilutions pour chaque application et chaque type de cellule ou de tissu.

• Une réactivité croisée avec la souris et le rat est indiquée, ce qui rend l’anticorps adapté aux études translationnelles ; toutefois, une vérification individuelle dans ces espèces est recommandée.

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