Anticorps monoclonal lapin Anti-ABCG1 pour WB, ELISA - P45844

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'ABCG1

• ABCG1, également appelé transporteur 8 à boîte de liaison à l'ATP ou homologue de la protéine White, est un membre de la sous-famille G des transporteurs ABC (ATP-binding cassette) et fonctionne comme un demi-transporteur qui forme probablement un homodimère.
• Il catalyse l'efflux dépendant de l'ATP de phospholipides comme la sphingomyéline, le cholestérol et des dérivés oxydés du cholestérol tels que le 7beta-hydroxycholestérol (PubMed:17408620, PubMed:24576892). Ce processus de transport lipidique est dépendant de l'albumine (PubMed:16702602). Références associées : PMID:17408620, PMID:24576892, PMID:16702602
• En exportant le 7beta-hydroxycholestérol cytotoxique, ABCG1 prévient la mort cellulaire, ce qui souligne son rôle dans le maintien de l'homéostasie lipidique cellulaire et la protection des macrophages contre l'apoptose induite par les oxystérols (PubMed:17408620). Références associées : PMID:17408620
• ABCG1 se localise sur la membrane du réticulum endoplasmique, la membrane de l'appareil de Golgi et la membrane cellulaire, permettant à la fois le trafic lipidique intracellulaire et l'efflux lipidique au niveau de la membrane plasmique.
• Il est exprimé dans de multiples tissus, avec une expression marquée dans les macrophages ; on note notamment que l'expression d'ABCG1 est régulée à la hausse dans les macrophages de patients atteints de la maladie de Tangier, ce qui le relie aux troubles du métabolisme du cholestérol.
• La palmitoylation post-traductionnelle d'ABCG1, telle qu'annotée dans UniProt, module probablement son association membranaire et son activité fonctionnelle.
• Le gène ABCG1 subit un épissage alternatif, générant plusieurs isoformes protéiques qui peuvent avoir des propriétés de régulation ou de transport distinctes.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à un peptide synthétique dérivé des acides aminés 100–200 d'ABCG1 humain (NP_004906.3), une région probablement exposée dans les échantillons dénaturés, ce qui rend l'anticorps potentiellement adapté pour la WB dans des conditions réductrices.
• Compte tenu du poids protéique prédit de 76 kDa, utilisez une gamme de marqueurs de poids moléculaire appropriée et optimisez le pourcentage de gel (par exemple 8–10 % de SDS-PAGE) pour obtenir une résolution optimale des bandes d'ABCG1.
• La réactivité croisée avec l'ABCG1 de souris et de rat suggère une conservation de l'épitope ; validez la spécificité à l'aide de lysats de types cellulaires pertinents, tels que les lignées de macrophages ou les macrophages primaires.
• Pour l'ELISA, envisagez d'utiliser la protéine ABCG1 recombinante ou le peptide d'immunisation comme antigène de revêtement et incluez des contrôles positifs et négatifs appropriés.
• Pour confirmer la spécificité de l'anticorps, intégrez des lysats cellulaires surexprimant ABCG1 ou des modèles knock-out/knock-down et testez une gamme de dilutions de l'anticorps.

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