Anticorps polyclonal de lapin anti-ABCA2 pour WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - Q9BZC7

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ABCA2

• L'ABCA2 (sous-famille A des transporteurs ABC membre 2), également connu sous le nom de transporteur 2 liant l'ATP ou ABC2, est un membre de la superfamille des transporteurs ABC impliqué dans la translocation dépendante de l'ATP de substrats à travers les membranes.
• Il fonctionne comme un transporteur de lipides probable qui module la séquestration du cholestérol dans l'endosome tardif/lysosome en régulant le métabolisme intracellulaire des sphingolipides, participant ainsi à l'homéostasie du cholestérol. Références associées : PMID:15238223, PMID:21810484, PMID:24201375
• L'ABCA2 peut modifier la distribution trans-bicouche de la céramide dans les bicouches membranaires intraluminales, favorisant sa rétention dans le feuillet externe et conduisant à une augmentation de l'activité de la céramidase acide, ce qui facilite la désacylation de la céramide en sphingosine et la séquestration du cholestérol libre lysosomal. Références associées : PMID:24201375
• La protéine est également impliquée dans la régulation de la production de bêta-amyloïde (Aβ), soit en modulant le métabolisme des sphingolipides pour affecter la transcription de la protéine précurseur de l'amyloïde (APP), soit par son rôle dans le traitement de l'APP par la γ-sécrétase. Références associées : PMID:22086926, PMID:26510981
• L'ABCA2 pourrait jouer un rôle dans la formation de la myéline (par similitude).
• Au niveau subcellulaire, l'ABCA2 se localise principalement aux membranes des endosomes et des lysosomes.
• L'analyse de l'expression tissulaire montre des niveaux élevés dans le cerveau, les leucocytes du sang périphérique et l'ovaire, avec une expression plus faible dans le rein et le foie.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation, la phosphorylation et la méthylation ; la protéine possède deux domaines de liaison à l'ATP et de multiples hélices transmembranaires, conformément à sa fonction de transporteur.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (acides aminés 140–350) se situe dans la région N-terminale de l'ABCA2 humaine ; les utilisateurs doivent vérifier l'identité de la séquence avec l'espèce cible si une réactivité croisée est attendue au-delà de l'humain, de la souris et du rat.
• Pour le Western blot, en raison de la grande taille de la protéine (~270 kDa), utilisez un gel de polyacrylamide à haut pourcentage (par exemple, 6–8 %) et des temps de transfert prolongés pour un transfert efficace.
• En immunofluorescence/immunocytochimie, les protocoles de fixation et de perméabilisation doivent être optimisés pour détecter les protéines membranaires des endosomes/lysosomes ; envisagez d'utiliser du méthanol ou une perméabilisation à base de détergents.
• La performance ELISA peut être évaluée à l'aide de fragments d'ABCA2 recombinants ou de lysats cellulaires ; l'ELISA indirecte peut convenir pour la détermination du titre.
• Lors de l'analyse de tissus de souris ou de rat, confirmez la réactivité croisée par alignement de séquence de la région de l'immunogène et envisagez d'utiliser des témoins positifs appropriés.

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