Anticorps monoclonal de lapin anti-ABCA1 pour WB, ELISA - O95477

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l’ABCA1

• ABCA1 (membre 1 de la sous-famille A de la cassette de liaison à l’ATP), également connu sous les noms ABC-1, CERP et protéine régulatrice de l’efflux du cholestérol, appartient à la superfamille des transporteurs de la cassette de liaison à l’ATP (ABC).
• Il fonctionne comme une ATPase transportant les phospholipides, transloquant la phosphatidylcholine et la phosphatidylsérine du feuillet cytoplasmique vers le feuillet extracellulaire des membranes, en association avec l’hydrolyse de l’ATP. Cette activité est essentielle au transfert des phospholipides vers les apolipoprotéines, initiant la formation de lipoprotéines de haute densité (HDL) naissantes. Références associées : PMID:24097981, PMID:35974019
• ABCA1 assure également l’efflux du cholestérol intracellulaire vers les apolipoprotéines, une étape essentielle du transport inverse du cholestérol et de la maturation des HDL. Références associées : PMID:10533863, PMID:14754908, PMID:24097981
• Principalement localisé au niveau de la membrane cellulaire et des endosomes, ABCA1 est largement exprimé, mais il est particulièrement abondant dans les macrophages, ce qui reflète son rôle clé dans l’homéostasie du cholestérol des macrophages.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation (phosphoprotéine) et la palmitoylation (lipidation), et la protéine contient des ponts disulfure ainsi que des sites de glycosylation, susceptibles de réguler sa stabilité et son activité.
• Compte tenu de sa fonction dans le métabolisme lipidique, ABCA1 est impliqué dans l’athérosclérose et les maladies cardiovasculaires associées ; les mutations d’ABCA1 sont liées à la maladie de Tangier et au déficit familial en HDL.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond aux acides aminés 1170-1350 de la région C-terminale de l’ABCA1 humain. Cette région est prédite comme étant intracellulaire, et les anticorps produits contre celle-ci peuvent détecter l’ABCA1 pleine longueur dans des Western blots en conditions dénaturantes. Il est recommandé de valider la spécificité dans des lignées cellulaires dont l’expression d’ABCA1 est connue, telles que les macrophages ou les hépatocytes.
• Pour le Western blot, notez le poids moléculaire prédit élevé de l’ABCA1 (environ 254 kDa). Utilisez des gels de polyacrylamide à faible pourcentage (par exemple, un gel à 6 %) et prolongez le temps de transfert afin d’assurer un transfert efficace des protéines de haut poids moléculaire. Incluez des marqueurs de poids moléculaire appropriés.
• Il a été signalé que cet anticorps présente une réactivité croisée avec l’ABCA1 de la souris et du rat. Lors de son utilisation chez ces espèces, vérifiez la réactivité en testant un contrôle positif, tel que des cellules dérivées de macrophages ou des tissus connus pour exprimer ABCA1.
• Pour les applications ELISA, optimisez la concentration de l’anticorps utilisé comme réactif de capture ou de détection. La réactivité de l’anticorps en ELISA peut permettre la mesure quantitative de l’ABCA1 dans des échantillons biologiques ; toutefois, l’utilisation d’un anticorps de détection approprié peut être nécessaire pour les formats sandwich.

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