Anticorps polyclonal Anti-14-3-3 Thêta pour WB, ELISA - P27348

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du 14-3-3 Thêta

• La protéine thêta 14-3-3, également désignée protéine 14-3-3 des cellules T, protéine 14-3-3 tau, ou protéine HS1, est codée par le gène YWHAQ.
• Elle fonctionne comme une protéine adaptatrice dans de nombreuses voies de signalisation, se liant généralement à des motifs contenant de la phosphosérine ou de la phosphothréonine sur les protéines partenaires, modulant ainsi leur activité.
• Spécifiquement, le 14-3-3 thêta régule négativement l'activité kinase de PDPK1, impactant les réseaux de signalisation en aval.
• La protéine se localise principalement dans le cytoplasme, ce qui est cohérent avec son rôle dans la transduction du signal intracellulaire.
• L'expression est abondante dans le cerveau, le cœur et le pancréas, avec des niveaux plus faibles dans le rein et le placenta. Notamment, elle est régulée à la hausse dans la moelle épinière lombaire des patients atteints de SLA sporadique, en particulier chez ceux présentant une implication prédominante des motoneurones inférieurs.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation, la nitration, la phosphorylation et la conjugation de type ubiquitine, ainsi que la formation de liaisons iso-peptidiques, qui régulent probablement ses interactions et sa stabilité.
• Une structure tridimensionnelle est disponible, fournissant des informations sur son sillon de liaison aux phosphopeptides et son architecture dimérique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (un peptide synthétique couvrant les acides aminés 49-149 du 14-3-3 thêta humain) cible une région spécifique, pouvant convenir pour détecter les épitopes linéaires dans des conditions de Western blot (WB) dénaturant.
• Pour l'ELISA, envisagez d'utiliser le peptide immunogène comme témoin positif ou comme antigène de revêtement pour valider la spécificité du test.
• Avec une réactivité croisée signalée pour la souris et le rat, cet anticorps peut être utilisé dans des études comparatives ; confirmez la réactivité dans le tissu ou la lignée cellulaire approprié avant l'analyse quantitative.
• Le poids moléculaire prédit est d'environ 28 kDa ; vérifiez la taille de la bande à l'aide de marqueurs de poids moléculaire appropriés et tenez compte du fait que les modifications post-traductionnelles peuvent provoquer de légers décalages.
• Comme le 14-3-3 thêta est cytoplasmique, la fractionnement subcellulaire ou l'immunoprécipitation peut enrichir la cible et améliorer la sensibilité de détection dans des échantillons complexes.
• Les anticorps polyclonaux peuvent présenter des variations d'un lot à l'autre ; incluez une optimisation appropriée du blocage et du lavage pour minimiser la liaison non spécifique.

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