Anticorps monoclonal de lapin anti-14-3-3 sigma pour WB, IHC-P, ELISA - P31947

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la 14-3-3 sigma

• La 14-3-3 sigma (également appelée Stratifine ou protéine marqueur des cellules épithéliales 1) est une protéine adaptatrice codée par le gène SFN, majoritairement exprimée dans les tissus riches en épithélium pavimenteux stratifié kératinisant.
• Elle exerce sa fonction en se liant aux motifs phosphosérine/phosphothréonine d'un large éventail de partenaires de signalisation, en modulant généralement leur activité, et est impliquée dans des voies telles que le cycle cellulaire, l'apoptose et la signalisation de croissance (PubMed:15731107, PubMed:22634725, PubMed:28202711). Références associées : PMID:15731107, PMID:22634725, PMID:28202711
• Elle agit comme un inhibiteur régulé par TP53/p53 de la progression du cycle cellulaire en phase G2/M, contribuant au point de contrôle des dommages à l'ADN (PubMed:9659898). Références associées : PMID:9659898
• La 14-3-3 sigma favorise la rétention cytosolique de la GTPase GBP1 en se liant à GBP1 phosphorylée, inhibant ainsi la réponse immunitaire innée (PubMed:37797010). Références associées : PMID:37797010
• Dans les cellules épithéliales, elle maintient l'adhésion des desmosomes par interaction et séquestration de PKP3 dans le cytoplasme, ce qui facilite l'échange au niveau des plaques desmosomiques et préserve l'adhésion intercellulaire (PubMed:24124604, PubMed:29678907). Références associées : PMID:24124604, PMID:29678907
• La protéine peut réguler l'autoubiquitination et la dégradation de MDM2, activant ainsi p53/TP53 (PubMed:18382127). Références associées : PMID:18382127
• La localisation subcellulaire inclut le cytoplasme, le noyau et la sécrétion, ce qui est cohérent avec ses rôles divers dans la transduction du signal et la communication intercellulaire.
• Les modifications post-traductionnelles clés incluent la phosphorylation et la conjugaison à l'ubiquitine, qui ajustent finement ses fonctions et ses interactions.
• L'expression tissulaire est largement restreinte aux épithéliums pavimenteux stratifiés, ce qui en fait un marqueur utile pour les études de différenciation épithéliale et de pathologie.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant à la région N-terminale (acides aminés 1-100) de la 14-3-3 sigma humaine. Cette région peut contenir des phosphoépitopes critiques ; assurez-vous que votre préparation d'échantillon préserve les états de phosphorylation si nécessaire.
• Pour le Western blot (WB), attendez une bande autour de 28 kDa (le poids moléculaire calculé est d'environ 27,8 kDa). Validez avec des contrôles positifs appropriés, tels que des lysats de tissus épithéliaux stratifiés ou de lignées cellulaires (par exemple HaCaT, A431) où une expression endogène est attendue.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), envisagez des méthodes de récupération d'antigène (par exemple tampon citrate, pH 6,0) et vérifiez la spécificité en utilisant la peau, l'œsophage ou un autre épithélium pavimenteux comme tissus contrôles positifs.
• En ELISA, l'immunogène peptidique permet un revêtement direct du peptide pour des configurations de test standard ; titrez la concentration d'anticorps pour optimiser le rapport signal sur bruit.
• Une réactivité croisée avec la 14-3-3 sigma de souris est rapportée ; cependant, un alignement de séquence entre espèces est recommandé avant utilisation sur d'autres organismes modèles.

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