Anticorps monoclonal de souris anti-Alpha-Fœtoprotéine (AFP) pour WB, IF/ICC, ELISA - P02771

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'alpha-fœtoprotéine

• L'alpha-fœtoprotéine (AFP), également connue sous le nom d'alpha-1-fœtoprotéine et d'alpha-fœtoglobuline, est une glycoprotéine sécrétée appartenant à la famille de l'albumine.
• L'AFP se lie au cuivre, au nickel et aux acides gras, et présente également une capacité modérée de liaison à la bilirubine, bien que moins efficacement que l'albumine sérique.
• Seule une fraction mineure (moins de 2 %) de l'AFP humaine présente des propriétés de liaison aux œstrogènes, indiquant une interaction limitée avec les ligands hormonaux.
• Elle est principalement synthétisée par le foie fœtal et le sac vitellin, et est la plus abondante dans le plasma fœtal ; les taux diminuent fortement après la naissance et sont faibles chez les adultes en bonne santé.
• La protéine est riche en modifications post-traductionnelles, notamment glycosylation, phosphorylation et sulfatation, et contient de multiples ponts disulfure.
• Structurellement, elle présente des domaines répétitifs et est classée comme une phosphoprotéine sécrétée liant les métaux.
• En tant que biomarqueur clinique bien établi, des taux sériques élevés d'AFP sont associés au carcinome hépatocellulaire, aux tumeurs des cellules germinales et aux troubles du développement fœtal, ce qui en fait une cible critique pour le développement d'anticorps diagnostiques.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène couvre presque la totalité de la protéine mature (acides aminés 19–609), ce qui peut fournir des épitopes sur plusieurs domaines ; envisagez une cartographie des épitopes si une détection spécifique d'un domaine est requise.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire rapporté est de 69 kDa ; cependant, en raison de la glycosylation, la bande observée peut être décalée, et des conditions réductrices/non réductrices peuvent être testées pour une résolution optimale.
• En immunofluorescence/ICC, l'AFP étant sécrétée, elle peut présenter un marquage de type vésiculaire ou extracellulaire ; une fixation et une perméabilisation appropriées (si nécessaire) doivent être validées pour le type cellulaire cible.
• Pour les applications ELISA, il est recommandé de tester en paire avec des anticorps de détection reconnaissant des épitopes non chevauchants pour éviter la compétition ; l'immunogène recombinant peut servir de contrôle positif.
• Une réactivité croisée avec l'AFP murine est rapportée ; lors de l'utilisation de modèles murins, l'AFP endogène peut être détectée ; incluez des contrôles appropriés pour distinguer les signaux exogènes des signaux endogènes.
• Les échantillons de sérum/plasma sont typiques pour la détection de l'AFP ; envisagez une optimisation de la dilution des échantillons en raison de la concentration élevée d'AFP dans certaines conditions.

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