Anticorps polyclonal de lapin Acétyl-p53-K382 (P04637) pour Dot Blot et ELISA

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'antigène de tumeur cellulaire p53 (TP53)

L'antigène de tumeur cellulaire p53 (TP53) est un facteur de transcription multifonctionnel qui joue un rôle central dans la suppression des tumeurs en induisant l'arrêt du cycle cellulaire, la réparation de l'ADN ou l'apoptose en réponse au stress cellulaire. Il agit comme un gardien du génome, régulant négativement la division cellulaire en contrôlant l'expression de gènes cibles clés, y compris les inhibiteurs des kinases dépendantes des cyclines. L'apoptose médiée par p53 implique la stimulation de l'expression de l'antigène BAX et FAS ou la répression de Bcl-2, et son activité pro-apoptotique est modulée par des interactions avec les protéines de la famille ASPP. De plus, p53 régule l'horloge circadienne en réprimant la transcription médiée par CLOCK-BMAL1 de PER2. Références connexes : PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724, PMID:15340061, PMID:24051492

La localisation de p53 dans plusieurs compartiments sous-cellulaires dépend de son état d'activation et de son isoforme. Elle est principalement nucléaire, mais peut être trouvée dans le cytoplasme, au niveau des corps nucléaires PML, des mitochondries, du réticulum endoplasmique et du centrosome. La translocation vers les mitochondries se produit sous stress oxydatif ou traitement à la mitomycine C, où p53 coopère avec PPIF pour activer la nécrose. Références connexes : PMID:15340061, PMID:17170702, PMID:11025664, PMID:12810724, PMID:22726440, PMID:27323408, PMID:28842590

p53 est exprimée de manière ubiquitaire, mais ses isoformes présentent des variations dépendantes des tissus. L'isoforme 2 est absente du cerveau, du poumon et de la prostate, tandis que l'isoforme 8 est limitée au côlon, à la moelle osseuse, aux testicules, au cerveau fœtal et à l'intestin. Références connexes : PMID:16131611

p53 subit de nombreuses modifications post-traductionnelles qui régulent sa stabilité et son activité. L'acétylation de la lysine 382 (K382) est médiée par des acétyltransférases telles que p300/CBP et améliore la liaison de p53 à l'ADN et son activation transcriptionnelle. Cette modification peut être inversée par des désacétylases, et la K382 peut également être méthylée ou diméthylée, soulignant un réseau réglementaire complexe. Références connexes : PMID:10656795, PMID:15448695, PMID:20228809, PMID:23431171, PMID:29681526, PMID:19608861, PMID:17707234, PMID:20870725, PMID:22864287

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène est un peptide acétylé synthétique correspondant aux résidus autour de la K382 de la p53 humaine. On s'attend à ce que l'anticorps reconnaisse spécifiquement la forme acétylée ; la réactivité croisée avec le peptide non modifié ou d'autres modifications sur ce site doit être testée.
• Pour les applications de dot blot, envisagez d'utiliser des échantillons de protéines dénaturées ou des peptides déposés sur des membranes. Pour l'ELISA, le revêtement avec le peptide immunogène ou la protéine p53 pleine longueur peut être approprié.
• Comme les anticorps polyclonaux peuvent présenter des variations d'un lot à l'autre, validez la spécificité de l'anticorps dans votre système expérimental à l'aide de témoins appropriés (par exemple, compétition avec peptide non acétylé, ou extraits de cellules traitées avec des inhibiteurs de désacétylases comme la trichostatine A).
• L'induction de l'acétylation de p53 peut être réalisée en traitant les cellules avec des agents endommageant l'ADN (par exemple, la doxorubicine, l'étoposide) avant la préparation des échantillons.
• L'anticorps est expédié dans des sacs de glace. À réception, aliquotez et stockez à –20°C ou moins pour une stabilité à long terme. Évitez les cycles répétés de congélation-décongélation.

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