Anticorps Monoclonal Lapin Acétyl-Histone H4 (Lys5) (P62805) pour WB, ChIP, CUT&Tag

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'Histone H4

L'histone H4 est un composant central du nucléosome, essentiel pour la compaction de l'ADN en chromatine et la régulation de la transcription, de la réplication, de la réparation de l'ADN et de la stabilité chromosomique. L'accessibilité de l'ADN est régie par un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles connu sous le nom de « code des histones ».

L'acétylation de l'histone H4 à la lysine 5 (K5 ; correspondant à Lys-6 dans UniProt P62805) est une modification pivot associée aux états de chromatine active. Cette marque est déposée par les histone acétyltransférases (HAT) et retirée par les désacétylases (HDAC), influençant dynamiquement l'expression des gènes. L'H4K5 acétylée est enrichie dans les régions promotrices des gènes activement transcrits et contribue à la décompaction de la chromatine et à l'activation transcriptionnelle. Références connexes : PMID:2474456, PMID:7664735, PMID:19608861

L'histone H4 est codée par plusieurs copies de gènes (H4C1–H4C16) situées dans des clusters d'histones sur les chromosomes 1 et 6. La protéine est hautement conservée entre les espèces, ce qui explique la large réactivité croisée prévue de cet anticorps. H4 est soumise à des modifications combinatoires étendues ; K5 peut également subir d'autres acylations telles que la crotonylation, la butyrylation et la 2-hydroxyisobutyrylation, soulignant la complexité du code des histones.

Au niveau subcellulaire, l'histone H4 est principalement nucléaire et s'associe aux chromosomes. Au cours de la spermatogenèse, l'histone H4 acétylée se localise dans le noyau aux spermatides de l'étape 11. Les modifications de la queue N-terminale, y compris l'acétylation K5, jouent un rôle pivot dans le remodelage de la chromatine et le recrutement de protéines effectrices. Références connexes : UniProt P62805

Conseils Expérimentaux et Techniques

• Cet anticorps monoclonal lapin a été élevé contre un peptide acétylé synthétique couvrant la lysine 5 de l'histone H4 humaine. Il est censé reconnaître spécifiquement l'H4 acétylée en K5 (Lys-6 dans UniProt P62805) et peut présenter une réactivité croisée minimale avec l'H4 non modifiée ou d'autres lysines acétylées.
• Pour le Western blot (WB), envisagez d'utiliser des préparations de protéines enrichies en histones ou extraites par acide pour améliorer le signal. Le poids moléculaire prédit de l'histone H4 est de 11 kDa.
• Dans l'immunoprécipitation (IP) et les applications basées sur la chromatine (ChIP, ChIP-seq, CUT&Tag), titrez l'anticorps et optimisez les conditions de réticulation/fixation. La large réactivité croisée d'espèces prévue (humain, souris, rat et autres) suggère une utilité dans les modèles mammifères, mais une validation dans le système d'échantillon spécifique est recommandée.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P) et l'ELISA, assurez-vous d'utiliser des contrôles appropriés (par exemple, compétition avec peptide non acétylé) pour confirmer la spécificité du signal.

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