Acétyl-Histone H4 K91 Anticorps Polyclonal de Lapin (P62805) – WB, IF/ICC, ELISA

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Histone H4

L'histone H4 est l'une des histones centrales qui forment le nucléosome, l'unité fondamentale de la chromatine. Avec H2A, H2B et H3, elle enroule l'ADN autour de l'octamère d'histones, compactant le génome et régulant l'accès pour la transcription, la réplication et la réparation. L'histone H4 joue un rôle central dans la régulation dynamique de la structure de la chromatine grâce à une vaste gamme de modifications post-traductionnelles (MPT), collectivement connues sous le nom de "code histone". Ces modifications incluent l'acétylation, la méthylation, la phosphorylation, l'ubiquitination et bien d'autres, qui se produisent principalement sur la queue N-terminale mais aussi sur le domaine globulaire.

L'acétylation de résidus lysine spécifiques sur l'histone H4 est associée à l'activation transcriptionnelle et à une structure de chromatine ouverte. La lysine 91 (K91), située dans le domaine globulaire de H4, est l'un de ces résidus qui peut être acétylé. L'acétylation sur K91 (correspondant à K92 dans l'isoforme UniProt P62805) a été démontrée comme régulant la dynamique de la chromatine et pouvant influencer les processus de réparation de l'ADN. Références connexes : PMID:19818714

La nature hautement conservée de l'histone H4 chez les eucaryotes garantit que les anticorps spécifiques de l'acétylation comme cet anti-acétyl-H4-K91 présentent une large réactivité croisée, ce qui en fait des outils précieux pour les études épigénétiques chez de multiples espèces. H4 est principalement localisée dans le noyau, associée aux chromosomes, et est présente tout au long du cycle cellulaire, les profils d'acétylation spécifiques changeant lors de la différenciation et du développement. Références connexes : UniProt P62805

Guide expérimental et conseils techniques

• Pour le Western blot (WB), utilisez des extraits nucléaires enrichis en histones ou des histones extraites à l'acide pour améliorer la détection. Envisagez d'inclure un contrôle négatif tel qu'un peptide non acétylé ou un traitement par un inhibiteur de désacétylase (par exemple, TSA) pour confirmer la spécificité pour la forme acétylée K91. Le poids moléculaire prédit de l'histone H4 est d'environ 11 kDa, mais la migration peut varier légèrement selon les MPT.
• En immunofluorescence / immunocytochimie (IF/ICC), optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation (par exemple, fixation au PFA 4% ou au méthanol, suivie de Triton X-100 à 0,1%) pour préserver l'épitope. Une co-coloration avec des colorants d'ADN (par exemple, DAPI) peut confirmer la localisation nucléaire.
• Pour les applications ELISA, utilisez un peptide synthétique acétylé K91 versus un peptide non modifié comme antigènes de revêtement pour évaluer la spécificité et le titre de l'anticorps. Cet anticorps est prédit pour réagir de manière croisée avec la souris, le rat et d'autres espèces en raison de la forte homologie de séquence de l'histone H4, mais vérifiez dans votre système expérimental.

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