Acétyl-Histone H4 (K8) Anticorps Polyclonal de Lapin (P62805) - WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA, ChIP, ChIP-seq

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Histone H4

L'histone H4 est un composant central du nucléosome, l'unité répétitive fondamentale de la chromatine. Les nucléosomes enroulent et compactent l'ADN, restreignant ainsi son accessibilité aux machineries cellulaires qui nécessitent l'ADN comme matrice. Grâce à ces interactions, les histones jouent un rôle central dans la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique.

L'accessibilité de l'ADN est régie par un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles (MPT) sur les histones, collectivement appelées le "code histone", ainsi que par le remodelage des nucléosomes. L'histone H4 est largement modifiée, en particulier sur sa queue N-terminale, avec des marques incluant l'acétylation, la méthylation, la phosphorylation, la citrullination et l'ubiquitination.

L'acétylation sur la lysine 8 (K8) de l'histone H4—correspondant à la position 9 dans la séquence UniProt (P62805)—est une modification bien caractérisée associée à la chromatine ouverte et à l'activation transcriptionnelle. Cette modification est régulée de manière dynamique par les histone acétyltransférases (HAT) et les désacétylases (HDAC). Références connexes : PMID:2474456, PMID:7664735, PMID:19608861.

L'histone H4 est principalement localisée dans le noyau et sur les chromosomes. Dans certains types cellulaires, comme les spermatides, l'H4 acétylée est observée concentrée dans le noyau pendant des stades de développement spécifiques.

L'histone H4 est encodée par de multiples copies de gènes, incluant HIST1H4A à HIST1H4L, HIST2H4A/B et HIST4H4, qui produisent des séquences protéiques identiques. Cette haute conservation entre les espèces sous-tend sa large réactivité croisée prédite.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le ChIP et le ChIP-seq, envisagez d'optimiser les conditions de réticulation et de fragmentation de la chromatine pour préserver la modification acétyle labile. L'utilisation d'inhibiteurs d'histone désacétylase (par exemple, butyrate de sodium, TSA) lors de la récolte des cellules peut améliorer la détection.
• En Western blot (WB), il est recommandé d'inclure à la fois le peptide acétyl-histone H4 et un peptide non acétylé comme contrôles de blocage pour confirmer la spécificité de l'anticorps.
• Comme l'histone H4 est hautement conservée, cet anticorps devrait présenter une réactivité croisée avec un large éventail d'espèces ; cependant, une validation dans le système d'échantillon pertinent est conseillée.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), les protocoles de fixation et de perméabilisation doivent être soigneusement évalués, car l'épitope acétyle peut être sensible aux traitements agressifs.
• Lors de l'utilisation de cet anticorps, la cohérence d'un lot à l'autre doit être surveillée, en particulier dans les tests quantitatifs, comme c'est la norme pour les réactifs polyclonaux.

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