Anticorps Polyclonal de Lapin anti-Acétyle-Histone H4-K16 (P62805) pour WB et ELISA – Recherche en Épigénétique

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'Histone H4

• Composant central du nucléosome : L'histone H4 est l'une des quatre histones centrales qui forment l'octamère de nucléosome, autour duquel l'ADN est enroulé pour former la chromatine. Cette structure fondamentale restreint l'accessibilité de l'ADN et régule ainsi la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication et la stabilité chromosomique. Références connexes : UniProt P62805
• Localisation subcellulaire : Dans des conditions d'état stable, l'histone H4 se trouve principalement dans le noyau, étroitement associée aux chromosomes. L'acétylation, telle qu'en K16, influence sa localisation dynamique ; par exemple, l'H4 acétylée est observée se localiser dans le noyau au stade 11 des spermatides. Références connexes : UniProt P62805
• Modifications post-traductionnelles et le code des histones : L'histone H4 est soumise à un vaste ensemble de modifications post-traductionnelles (PTM) sur sa queue N-terminale, incluant l'acétylation, la méthylation, la phosphorylation, l'ubiquitination et diverses marques d'acylation (ex : crotonylation, butyrylation, succinylation). Ces modifications constituent un « code des histones » qui régit la structure de la chromatine et l'expression des gènes. L'acétylation à des résidus lysine spécifiques, incluant K16, est une marque caractéristique de l'euchromatine transcriptionnellement active. Références connexes : UniProt P62805
• Signification fonctionnelle de l'acétylation K16 : L'acétylation de H4 à la lysine 16 (H4K16ac) est particulièrement critique pour le repliement d'ordre supérieur de la chromatine et la régulation transcriptionnelle. Cette modification neutralise la charge positive de la lysine, perturbant les interactions internucléosomales et favorisant une conformation de chromatine ouverte. Elle est impliquée dans la compensation de dosage, la réparation des dommages à l'ADN et le vieillissement cellulaire. Références connexes : PMID:2474456, PMID:7664735, PMID:19608861 (acétylation générale dans les histones)
• Conservation évolutive : La séquence d'acides aminés de l'histone H4 est remarquablement conservée chez les eucaryotes, de la levure à l'humain, ce qui sous-tend la large gamme de réactivité croisée prédite pour cet anticorps. Références connexes : UniProt P62805

Guides Expérimentaux et Conseils Techniques

• Considérations de conception de l'immunogène : L'anticorps a été élevé contre un peptide acétylé synthétique correspondant aux résidus entourant la lysine 16 de l'histone H4 humaine. Cette conception assure la spécificité pour l'état acétylé de la K16 ; cependant, la réactivité croisée avec l'H4 non modifiée ou d'autres lysines acétylées doit être évaluée dans votre système expérimental.
• Directives pour le Western blot (WB) : Lors de l'exécution d'un WB, envisagez d'utiliser des extraits d'histones cellulaires totaux ou des histones extraites par acide de cellules humaines, de souris ou de rat, car la réactivité croisée prédite est large. En raison du faible poids moléculaire (~11 kDa), utilisez des gels SDS-PAGE à 15 % ou des gels en gradient pour une résolution optimale. Validez la spécificité en comparant les signaux avec des témoins non acétylés ou en utilisant des inhibiteurs de désacétylases (ex : TSA, butyrate de sodium) pour confirmer l'engagement de la cible.
• Applications ELISA : Cet anticorps peut convenir pour la détection par ELISA de peptides H4 acétylés ou d'histones purifiées. Confirmez les concentrations optimales d'antigène de revêtement et envisagez un blocage avec des tampons de blocage non-phospho/non-acétyl pour réduire le bruit de fond.
• Réactivité croisée d'espèces : Une large réactivité croisée est prédite sur la base de la forte conservation évolutive de la séquence de l'histone H4. Bien que l'anticorps ait été signalé comme réagissant avec l'humain, la souris et le rat, une vérification dans d'autres espèces est recommandée en raison de différences potentielles de PTM.
• Note technique générale : Comme pour tous les anticorps spécifiques aux PTM, assurez-vous que la préparation des échantillons minimise l'activité des désacétylases endogènes (ex : inclure des inhibiteurs de HDAC dans le tampon de lyse) pour préserver le signal d'acétylation.

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